活性蛋白方案,终于让我找到了

信息来源:金开瑞 作者:genecreate 发布时间:2017-03-29 13:37:12

金开瑞蛋白平台积累了十年万余种重组蛋白成功的表达经验,搭配全国范围最全的表达系统,以最专业全面(高达十五项参数)的蛋白性质预测分析,为您选择推荐最合适的表达方案组合拳,最大程度为您提供具有活性的目的蛋白!同时,金开瑞免费赠送价值2000元的LC-MS-MS二级质谱鉴定服务,为最终表达的目的蛋白进行身份验证,让您获得最放心的实验结果!

专业的服务流程

专业的生物信息学分析——免费提供

  • 序列同源性搜索
  • 稀有密码子检测
  • 保守结构域预测
  • 半衰期预测
  • 不稳定性预测
  • 可溶性预测
  • 二级结构预测
  • 信号肽预测
  • 跨膜结构域预测
  • 锌指结构域预测
  • 功能结构域预测
  • 亚细胞定位预测
  • 非经典分泌蛋白预测
  • 翻译后修饰(糖基化、甲基化、乙酰化、磷酸化、豆蔻酰化、异戊烯化等)预测
  • 三级结构预测

为您提供您的兴趣蛋白的理化性质、生物学功能、分子结构方面的信息,为蛋白表达系统的选择和表达条件的优化提供信息帮助,同时也帮助您更加了解您的兴趣蛋白!

专业的表达系统组合拳及技术优化

金开瑞根据您的蛋白性质、生物学功能及后期应用等进行组合拳推荐,包括无细胞、大肠、酵母、昆虫、哺乳五大表达平台的组合:

无细胞表达 大肠杆菌可溶性表达 毕赤酵母重组表达 昆虫细胞表达 哺乳动物细胞表达
表达毒性蛋白、跨膜蛋白、蛋白复合物、同位素标记蛋白等 表达原核蛋白、简单真核蛋白等 表达真核蛋白、分泌蛋白、某些胞质定位且无糖基化修饰蛋白等 表达高等真核生物蛋白、分泌蛋白、多元蛋白复合物等 表达有复杂空间结构及修饰等的真核蛋白等
策略:优化蛋白序列中稳定mRNA二级结构的N端序列、可保证蛋白活性的去垢剂(如DDM、FOS-12、DM、β-OG等)种类和最低溶解浓度,根据优化组合进行后续放大实验。 策略:构建pCold系列重组质粒,转化Arctic Express宿主,低温诱导表达。优化培养温度、IPTG浓度、培养时间,根据最高产量参数组合进行放大。 策略:优化筛选自主改造高效分泌载体(pPIC9K、pPIC9K高效融合载体、pPICZA、pGAPZa、pPaSUMO3)与表达宿主(GS115、KM71、X33)正交组合;对胞内表达蛋白,采用自主改造pPIC3.5k载体与宿主GS115、KM71、X33组合筛选;采用自主研发的FastScreen快速筛选技术进行快速筛选。 策略:采用交配辅助遗传整合克隆(MAGIC)系统快速构建重组杆状病毒质粒;进行自主改造pFastBac1载体(pFastBac1-GST和pFastBac1-eGFP高效融合载体)与AcNPV-sf9细胞和AcNPV-high5细胞的两种表达系统组合优化,根据优化组合进行放大。 策略:采用自主改造的以CMV为启动子的高效表达载体pSec-Tag-2A瞬转人胚肾细胞系293细胞或者仓鼠卵巢细胞CHO细胞,或进行两个不同重组载体的共转染,控制培养细胞的活力及密度并进行实时检测,根据优化组合进行放大。

根据各平台的优势及适用性,金开瑞为您推荐不同的组合拳,并制定表达活性蛋白的最优方案,根据选择的表达系统个数进行折扣处理,最大限度为您节省时间和成本,同时我们也为您制定蛋白活性检测方案或帮您优化蛋白活性检测方案,让您获得您想要的活性蛋白!我们承诺,如果我们最终提供的蛋白没有活性,小试费用只收取一半!

分类依据 蛋白种属/研究目的 蛋白定位 蛋白举例 推荐组合拳
生理功能 病毒蛋白 / 衣壳蛋白 昆虫+酵母+大肠
原核蛋白 胞内蛋白 胞内蛋白 大肠+酵母
分泌蛋白 纤维素酶 大肠+酵母+昆虫
膜蛋白 跨膜蛋白 无细胞
真核蛋白 胞内蛋白 激酶 酵母+昆虫
呼吸酶等 大肠+酵母胞内
分泌蛋白 激素 酵母分泌+大肠
白介素 酵母分泌+大肠
肿瘤坏死因子 酵母分泌+大肠
脂蛋白 酵母+无细胞
抗体 哺乳+昆虫
干扰素 酵母分泌+哺乳+大肠
集落刺激因子 酵母分泌+大肠
生长因子 大肠+酵母
趋化因子 酵母分泌+大肠
膜蛋白 跨膜蛋白 无细胞
研究方向 蛋白结构解析 / / 酵母+哺乳+大肠
酶相关活性检测 / / 酵母+哺乳+昆虫+大肠
蛋白/分子间相互作用 / / 酵母+哺乳+大肠

专业的蛋白身份鉴定——免费提供

为了保证为您提供的蛋白序列与您的预期一致,金开瑞免费为您提供一次表达蛋白的胶点二级质谱鉴定服务!我们采用AB SCIEX 5600-plus质谱平台MS/MS技术对纯化蛋白进行质谱胶点鉴定及2种修饰位点鉴定,与MALDI-TOF-MS相比能提供更高的可信度以及蛋白的修饰类型和修饰位点等结构信息,为表达的蛋白进行进一步的身份验证,确保为您提供的蛋白身份明确!

专业的数据管理及交付

金开瑞为您提供服务过程中的详细原始数据及结题报告,包括各表达系统的测序报告、实验条件、蛋白表达纯化检测结果、蛋白活性分析结果、质谱鉴定结果。

在线咨询 调研有礼

一等奖2名 价值599元Kindle平板电脑1台
二等奖4名 价值199元双肩包1个
三等奖6名 价值79元小米手环1个
纪念奖18名 8G U盘1个or晴雨伞1把

1、我们将从所有参与调研的客户中,随机抽取30名,送出奖品。
2、本活动解释权归金开瑞所有
3、本活动截止到2017年4月30日

 
 




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