服务介绍
实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/qRT-PCR,是指在PCR反应体系中加入荧光标记物,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析的方法。一般用于mRNA转录水平的定量研究、不同样本或基因组中DNA拷贝数的测定、基因芯片结果验证、药效分析等。
服务流程
接收订单及样品
RNA提取
RNA质量检测
样品cDNA合成
定量试验
数据分析
结果交付
售后服务
客户提供
样品及尽可能详细的背景信息(如物种信息,扩增目的基因NCBI登录号,相关文献和样品来源等)。
样品:组织应不少于100 mg;
细胞10^6-10^7个细胞;
细胞或组织裂解液总RNA浓度须大于1 mg/mL,单个样品不少于50 μL;
cDNA不少于30 μg。
(组织需液氮速冻、细胞收获后加入Trizol保存于-80度。样品用干冰寄送。避免各类污染和反复冻融。)
最终交付
- 溶解曲线、Ct值及完整实验报告;
- 实验报告内容包括所提取RNA浓度、荧光定量PCR原始数据及分析结果;
- 荧光定量PCR完整的实验步骤、使用仪器、软件设置参数等。
服务说明
服务名称 | 服务内容 | 服务周期(工作日) |
荧光定量PCR (Real-time qPCR) |
普通引物合成(客户提供特异性序列) | / |
普通引物设计+合成+特异性筛选 | 3-5个 | |
LncRNA、circRNA设计+合成+特异性筛选 | 6-8个 | |
MicroRNA引物(客户提供颈环和qPCR特异性序列) | 12-16个 | |
MicroRNA颈环引物设计+合成+特异性筛选 | 12-16个 | |
RNA提取及逆转录 | 2-3个 | |
荧光定量PCR(不限RNA种类) | 实际样品数量来定 |