服务介绍
ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常见的免疫学检测技术，可用于检测血清、唾液、尿液等生物样本中的蛋白质、抗体等分子。该技术基于特异性抗原与抗体的结合反应，利用酶标记的二抗或底物进行检测。ELISA有直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA等不同类型，具有高灵敏度、特异性和可重复性，广泛应用于医学、生命科学、环境监测等领域。
服务优势
- 高灵敏度：ELISA可以检测非常低浓度的目标物质，通常在皮克克或纳克克级别，使其在许多应用中具有很高的检测敏感性。
- 高特异性：ELISA使用特异性的抗体或抗原对目标物质进行识别和捕捉，从而可以准确地检测和区分目标物质，具有较低的交叉反应性。
- 宽泛的应用范围：ELISA技术适用于检测和测量各种类型的生物分子，如蛋白质、抗体、抗原、激素、药物等，广泛应用于生物医学研究、临床诊断和药物开发等领域。
- 高通量性：ELISA可以同时处理多个样品，通过使用多孔板或高通量读数设备，可以快速高效地进行大规模样品处理和分析。
- 可定量性：ELISA技术可通过与标准曲线进行比较，对目标物质的浓度进行定量分析，提供可靠的定量结果。
- 可重复性和稳定性：ELISA的实验结果具有良好的重复性和稳定性，可以在不同实验室和不同时间点进行重复验证，结果具有一致性。
服务流程
客户提供
需检测的样品（培养上清、血清、血浆等），需-20℃保存，避免反复冻融；
抗原（抗原鉴定需提供），需提供足量抗原，对抗原的纯度及质量要求将依据实验要求进行商讨后决定；
抗体（抗体鉴定需提供），需提供足量一抗（或由金开瑞代为购买），同时请提供商业抗体的详细说明书，便于我们按照说明书要求精确实验；
其他信息，包括：1、标本编号；2、所测项目；3、是否做复孔； 4、实验后标本是否寄回； 您无需提供二抗，为了保证试验顺利准确，您所提供的抗体、抗原信息务必准确详细，我们的工作人员会按照ELISA标准的SOP流程操作。
最终交付
- 检测实验报告。
服务说明
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服务项目 |
细分 | 服务周期（工作日） |
| ELISA检测 |
血清、细胞上清 |
7-10（视样本） |
相关资源
1、ELISA实验检测步骤
● 涂覆：将特异性抗体或抗原溶液加入到微孔板中，并通过吸附或共价结合的方式将其固定在孔板表面。
● 阻断：加入阻断缓冲液，防止非特异性结合。
● 样品加入：加入待测样品，使其与固定在孔板上的特异性抗体或抗原结合。
● 洗涤：使用洗涤缓冲液洗去未结合的物质。
● 检测：加入酶标记的二抗，使其与待测物结合。
● 洗涤：再次使用洗涤缓冲液洗去未结合的物质。
● 底物添加：加入底物溶液，使其与酶标记的二抗反应，产生可测量的信号。
● 反应停止：加入停止液停止底物反应。
● 读取结果：使用酶标仪或光度计测量反应产生的颜色强度或发光强度。
2、ELISA实验结果不如预期是什么原因？
（1）低信号/阴性结果：
▶ 样品处理问题：可能存在样品稀释不当、保存不当、存在干扰物质等。
▶ 抗体质量问题：使用的抗体可能与目标物质结合不充分或不特异。
▶ 实验操作问题：可能存在洗涤不彻底、孵育时间过短等实验操作不准确的问题。
（2）高背景/假阳性结果：
▶ 阻断问题：阻断步骤不充分，导致非特异性结合。
▶ 抗体交叉反应：使用的抗体可能与其他非目标物质发生交叉反应。
▶ 样品污染：存在非特异性的样品污染，如细胞碎片、大量蛋白质等。
（3）结果变异性：
▶ 实验条件问题：实验条件（如温度、湿度、孵育时间）的不一致性可能导致结果的变异性。
▶ 实验重复性问题：可能存在实验操作的差异或者试剂批次的差异，影响结果的一致性。
（4）非线性结果：
▶ 标准曲线问题：标准曲线的制备可能存在误差，导致浓度计算不准确。
▶ 高浓度样品稀释问题：如果使用高浓度的样品进行稀释，稀释比例选择不当可能导致非线性结果。
3、ELISA技术的具体应用及例子
● 血清抗体ELISA：用于检测血清中特定病原体抗体，如HIV抗体ELISA、乙肝表面抗原抗体ELISA等。
● 肿瘤标志物ELISA：用于检测血清或组织中的肿瘤标志物，如癌胚抗原（CEA）ELISA、前列腺特异性抗原（PSA）ELISA等。
● 细胞因子ELISA：用于细胞因子检测的存在和浓度，如肿瘤坏死因子（TNF）ELISA、白介素-6（IL-6）ELISA等。
● 免疫球蛋白ELISA：用于定量检测血清中的免疫球蛋白类别和浓度，如IgG ELISA、IgM ELISA等。
● 细胞表面受体ELISA：用于检测细胞表面受体的存在和表达水平，如CD4 ELISA、CD44 ELISA等。
● 标签蛋白ELISA：用于检测特定标签蛋白的存在和浓度，如葡萄糖氧化酶（HRP）ELISA、碱性磷酸酶（AP）ELISA等。
● 组织特异性蛋白ELISA：用于检测组织特异性蛋白的存在和表达水平，如神经元特异性蛋白（NSE）ELISA、心肌肌钙蛋白（cTnI）ELISA等。
● 激素ELISA：用于检测血清中的激素水平，如雌激素ELISA、甲状腺素ELISA等。
