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外泌体简介
Exosomes Introduction
外泌体
外泌体是一种能被机体内大多数细胞分泌的具有脂质双分子层膜结构的微小囊泡。
动物外泌体大小： 30 ~ 150 nm，植物类外泌体大小：50~1000nm，大多数类型的细胞都可以分泌外泌体。外泌体也广泛存在于体液中，包括血液、眼泪、尿液、唾液、乳 汁等，外泌体中富含核酸、蛋白、脂质等活性生物分子。
外泌体频繁穿梭于细胞之间，为细胞之间的通信提供了桥梁。成为疾病标志物、疾病机理、药物开发等研究的创新热点。 外泌体在免疫中抗原呈递、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等生理病理上起着重要的 作用。同时，不同细胞分泌的外泌体具有不用的组成成分和功能，可作为疾病诊断的生物标志物。
外泌体应用领域
Exosomes Application 疫苗
疫苗接种载体，针对各种传染病的疫苗设计中发挥重要作用
基因治疗和组织再生
心血管疾病基因治疗，在骨骼、肌肉、血管和神经、软骨、牙本质以及口腔和颅面再生中发挥重要作用
做为载体递送药物
搭载核苷酸、小分子药物，搭载核苷酸、小分子药物，肽及细胞因子
眼科疾病诊断
视觉系统中可能有重要作用，如外泌体与青光眼和黄斑变性的病理生理相关
服务说明
Service Description技术流程
外泌体
细胞、植物、动物模型、组织、临床样本
鉴定
TEM、NTA
Western Blot
验证
qPCR、Westem Blot、ELISA、免疫组化
功能
体内研究、体外研究
机制
分子同相互作用如：RNA、蛋白
高纯度的植物外泌体提取方法
打破技术壁垒
功能试验
增殖、凋亡、侵袭迁移、细胞衰老、血管生成、细胞周期
高通量测序
PIP、pull down、病毒包装、基因编辑
体内成瘤实验
皮下成瘤，小动物活体成像
分子生物实验
PCR、Western Blot、免疫荧光、ELISA
客户提供与最终交付
- 客户提供
- 细胞；
培养上清；
血浆（全血）；
血浆（血清）等。
- 服务内容
- 外泌体研究整体方案设计；
外泌体提取/粒径测量/电镜检测；
外泌体蛋白组/转录组。
- 最终交付
- 外泌体粒径检测报告；
WB检测结果；
q-PCR相关检测结果；
电镜图片；
NGS测序结题报告；
蛋白组学结题报告。
- 服务周期
- 与客户协定
收费与周期
Charge and Period| 外泌体服务项目收费 | 报价 | 周期（工作日） | |
|---|---|---|---|
| 外泌体提取 | 血清/血浆 | 500 | 15-20个工作日（含粒径、电镜时间） |
| 细胞培养上清 | 800 | 15-20个工作日（含粒径、电镜时间） | |
| 植物外泌体（提取成功过） | 1000 | 15-20个工作日（含粒径、电镜时间）提取不成功，不收费 | |
| 植物外泌体（首次提取） | 1500 | 15-20个工作日（含粒径、电镜时间）提取不成功，不收费 | |
| Nanosight（粒径检测） | 500 | 5-10个工作日 | |
| 透射电镜检测（6张图） | 600 | 5-10个工作日 | |
| 外泌体的Zeta电位检测 | 600 | 5-10个工作日 | |
| 外泌体纳⽶流式细胞术（粒径检测） | 600 | 5-10个工作日 | |
| 纳⽶流式检测外泌体的膜蛋⽩（CD9、CD63、CD81） | 1500/套 | 15-20个⼯作⽇（含粒径、电镜时间） | |
| 外泌体wb(CD9、CD63、CD81、TSG101中的指标) | 250/样/基因（含抗体费⽤） | 15-20个⼯作⽇（含粒径、电镜时间） | |
| PKH26外泌体染色 | 2500 | 10个工作日 | |
| 外泌体miRNA测序 | 2300 | 25个工作日 | |
| 外泌体在小鼠体内的三维离体成像 | 商议 | 商议 | |
| 外泌体工程化改造 | 商议 | 商议 | |
外泌体常见问题
Frequently Asked QuestionQ1：样品在提取外泌体之前是否可以低温保存？
A：可以，对于血液类样本冻存前，首先要离心去除细胞和血小板，再将样品分装冻存于-20或-80℃。但最好还是选择用新鲜样品立即进行提取。长期应保存于-80℃，无须加冻存液；短期保存（1-2天内）放置在4℃即可。
Q2：粘度过大的样品如何处理？
A：样品粘度过大一般是由于细胞分泌物较多所致，可用1×PBS缓冲液对样本进行等体积稀释。
Q3：培养细胞时，如何去除血清来源的外泌体？
A：多数情况下，细胞在体外培时养需要血清，而血清中一般都含有外泌体，为避免血清对细胞外泌体的污染，可采用以下两种方法：
（1）将细胞培养用的血清通过1×105g超速离心10h以去除血清外泌体。
（2）选择无血清培养基进行细胞培养。
Q4：无外泌体血清培养基（或者无血清培养基）在什么时候使用？
A：细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后，细胞融合度约为60%-70%时，移去原有含血清的培养基，换成新鲜的无外泌体血清培养基（或者无血清培养基），继续培养24-48h，细胞融合度达到80%-95%左右时收取上清,该上清液即可用于提取外泌体。
Q5：细胞培养过程中的死细胞是否会影响外泌体的提取？
A： 会的，在收获细胞时，应确定死亡细胞占比不超过5%。因为在细胞凋亡或死亡过程中会释放大量大小不等的囊泡，进而导致活细胞产生的外泌体被污染。
荣誉与认证
Honor and Certification
2014年入选“第七批3551人才计划”
2016年高新技术企业
2016年入选“黄鹤英才（科技）计划”
2017年入选“千企万人”支持计划
2018年瞪羚企业
2019年瞪羚企业
2019年高新技术企业
2020年基因操作系列关键技术的创新与应用
2021年瞪羚企业
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