表面等离子共振(SPR)

表面等离子共振(SPR)

  • 免标记
  • 高灵敏
  • 高通量
  • 非破坏

服务特色

SPR技术是解析生物分子间相互作用的“金标准”。其独特的实时、免标记和高灵敏度分析能力,能够精准获取结合动力学与亲和力数据,广泛应用于基础生物机制研究、抗体表征、药物筛选等多个关键环节,为科研探索和药物研发决策提供至关重要的实验依据。

服务介绍

表面等离子共振(surface-plasmon resonance,简称SPR)技术是一种基于光学、非标记的新型检测分析技术,可用于实时检测两个或更多分子间的结合作用。其仪器平台的通量、灵活性及灵敏度较高,能够让研究者在结合研究中对生物分子的相互作用进行表征,并且可广泛适用于不同分子,如离子、分子片段、小分子、蛋白质、病毒等,还可以提供诸如亲和力、动力学、热力学等生物物理数据。

服务优势

  • 免标记检测: 无需对分析物进行荧光或放射性标记,保持分子天然状态。
  • 实时动态监测: 直接、实时地观察分子结合与解离的全过程。
  • 高灵敏:可检测极低浓度(皮摩尔甚至飞摩尔级)的样品。
  • 非破坏: 对样品通常是非破坏性的,样品可回收。
  • 高通量: 现代SPR仪器支持多通道并行检测,提高效率。
  • 动力学: 直接获得分子相互作用的结合和解离速率常数。
  • 定量精准: 直接测量由分子结合引起的质量变化,提供绝对定量的结合信息。

服务说明

适用范围

• 生物医学领域:广泛应用于蛋白-蛋白、抗体-抗原、蛋白-小分子、抗体-多肽、蛋白-DNA、DNA-DNA、蛋白-纳米材料等分子间相互作用力,检测样品中须有一种是蛋白,且两种样品纯度要求均高。

• 药物研发领域:适用于药物筛选、药物-靶标相互作用研究和药物代谢动力学研究等领域,可通过监测化合物和靶标的亲和力作用大小来快速筛选先导化合物,还能为药物构效关系提供有效的动力学数据。

• 其他领域:如表面等离子体共振传感器、扫描近场光学显微技术、薄膜光学和膜厚测量、全息成像技术、精密角度测量等领域也有应用。

 

技术对比

项目

动力学

蛋白需求量

(最低)

小分子需求

核酸送样量

提供参数

适用范围

取材寄送

MST

50μg

1mg

5OD

结合常数 KD

用于检测蛋白/核酸与另一种物质的相互作用并计算摩尔浓度

蛋白推荐干粉,小分子推荐粉末,推荐干冰运输足量,出于保存难度,蛋白一般不推荐回寄

SPR

50μg

1mg

5OD

结合常数 KD、结合速率常数 Ka、解离速率常数 Kd

用于检测蛋白/核酸与另一种物质的相互作用并计算摩尔浓度

蛋白推荐干粉,小分子推荐粉末,推荐干冰运输足量,出于保存难度,蛋白一般不推荐回寄

SPR:技术传统,使用最多,接受度和文献都最高。
MST:测结合力较弱的检测,首选MST,或者作为补充数据检测,但是数据单一,只有亲和力数据。

常见问题与解析 (Q&A)

Q:SPR实验中如何处理非特异性相互作用?

非特异性相互作用可能是由于样品或缓冲液中的杂质吸附到芯片表面引起的。使用适当的阻滞剂、控制实验,或者在缓冲液中添加表面活性剂,设置参考通道扣除背景,以减少非特异性相互作用的影响。

Q:SPR实验中为什么观察到高背景噪音?

可能是由于芯片表面的非特异性吸附引起的。使用适当的阻滞剂或修饰表面,以减少非特异性吸附,从而降低背景噪音。

Q:为什么SPR实验中得到的亲和力较弱?

亲和力较弱可能是由于生物分子的结合弱或浓度较低引起的。优化实验条件,增加生物分子的浓度,或者考虑使用增强亲和力的方法。

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