基因合成是指利用化学方法将一段完整的DNA序列合成成一条完整的DNA分子的过程，通常通过连接短的寡核苷酸序列逐步合成长链DNA。基因合成技术可以根据需求设计合成包括蛋白质编码序列、RNA干扰分子、基因表达调控元件等各种功能元件。这项技术在现代生命科学、医学研究、生物制药等领域都有着广泛的应用，可以为研究人员提供一种快速、高效的合成DNA分子的方法，为基因工程和基因组学研究提供了有力支持。

服务优势

自主研发的超长识别序列核酸内切酶能精确切割双链DNA，且酶切位点可以根据要求定制，可用于基因大片段的组装，为合成生物学又添一件利刃。
自主研发的超低反应温度多段重组酶，反应、转化均可在冰上进行，真正实现“One Step”。
新技术工艺更稳定，周期更短，价格更实惠。

服务流程

订单接收

项目评估

基因合成

质控

发货

客户提供

基因序列或蛋白质氨基酸序列

最终交付

约4 µg含有目的片段的高纯度冻干质粒DNA；
含有重组质粒的穿刺菌或甘油菌一管（默认菌株为TOP10具体以样品管壁标签为准）；
发货文件主要包括如下内容：测序结果、COA报告、sqd文件、seq文件。

服务说明

服务内容	基因长度	周期
基因合成	0~1kb	7
	1kb~2kb	8-13
	2kb~3kb	12-17
	3kb~4kb	16-20
	4kb~5kb	20-25
	5kb~6kb	25-30
	大于6kb	咨询

案例展示

相关资源

1、基因合成实验中涉及到的一些专属名词及释义

● 寡核苷酸：由较少数量的核苷酸单元组成的短链，常用作DNA合成过程中的引物。

● 固相合成：一种常用的DNA合成方法，其中DNA链在固相材料（通常是小颗粒）上逐渐构建，通过逐步添加单个核苷酸单元来进行。

● PCR（聚合酶链式反应）：一种常用的DNA复制技术，通过不断循环的变温步骤，在体外扩增和复制目标DNA序列。

● 载体：用于将合成的DNA序列转移到细胞中的DNA分子。常见的载体包括质粒、病毒或合成的DNA片段。

● 克隆：将DNA插入到载体中的过程，形成克隆DNA。克隆可用于扩增、保存和研究特定的DNA序列。

2、涉及基因合成的实验举例

实验类型	使用基因合成的应用
抗体定制	合成可变区域（variable region）或全长重链和轻链的基因序列，以构建定制的抗体。
双荧光素酶报告基因实验	构建包含双荧光素酶基因的报告基因载体，用于监测目标基因的表达水平和调控机制。
RNA干扰（RNAi）实验	合成小干扰RNA（siRNA）或小核苷酸发夹（shRNA），以抑制目标基因的表达。
CRISPR-Cas9基因编辑实验	合成CRISPR RNA（crRNA）和转录单元（tracrRNA），用于导向Cas9蛋白靶向基因组中的特定位点，实现基因编辑和修饰。
蛋白质标记实验	构建带有特定标签序列的蛋白质表达载体，用于蛋白质的纯化、定位和可视化，如融合标签（如His标签、GST标签）或荧光标签（如GFP标签）等。
克隆和表达实验	合成目标基因的DNA序列，并将其插入表达载体中，以实现目标基因的表达和产生特定蛋白质。
DNA纳米技术实验	利用基因合成构建DNA纳米结构和纳米器件，用于生物传感、药物传递、分子计算等应用。
基因组重编程实验	合成和设计基因组的改造，以研究基因组的功能、调控和重编程。

3、基因合成中用于设计、分析和操作合成的工具简介

工具	功能
ApE (A plasmid Editor)	用于DNA序列编辑和分析的免费软件，可以进行序列标记、限制酶切位点分析、引物设计等。
SnapGene	用于DNA序列设计、分析和模拟的商业软件，提供直观的界面和许多实用功能，如序列编辑、PCR模拟、蛋白质序列注释等。
Vector NTI	商业软件套件，用于DNA序列设计、分析和操作。它提供了多种工具，包括序列比对、引物设计、限制酶切位点分析等
Serial Cloner	免费的DNA序列编辑和分析软件，提供基本的序列操作和分析功能，如序列标记、PCR引物设计、限制酶切位点分析等。
Primer3	用于设计PCR引物的广泛使用的免费在线工具，根据给定的参数和目标序列自动设计引物。
OligoAnalyzer	用于评估DNA或RNA序列的理化特性和引物设计的免费在线工具。可以预测引物的熔解温度、GC含量、二级结构和互补性等参数。
BLAST (Basic Local Alignment Search Tool)	用于序列比对和相似性搜索的免费在线工具，可以在数据库中搜索与给定序列相似的序列。
EMBOSS (European Molecular Biology Open Software Suite)	提供一系列免费的生物信息学工具，用于DNA序列分析，如ORF预测、限制酶切位点分析、序列比对等。
UCSC Genome Browser	提供基因组序列和注释的在线浏览器，可以检索和分析各种物种的基因组信息。
Benchling	商业化实验室操作平台，用于设计、分析和操作DNA序列。提供了多种实用功能，如序列编辑、引物设计、限制酶切位点分析、克隆等。

4、基因合成失败及原因分析

①合成产物不存在/未扩增成功：

● 引物设计问题：引物序列选择不当，导致与目标序列不特异结合。

● 引物合成问题：引物质量不佳，包括错配、缺失或杂质。

● PCR条件问题：PCR反应条件不正确，如温度、时间和酶浓度等。

②扩增产物存在杂交/非特异性扩增：

● 引物设计问题：引物与其他非目标序列存在非特异性结合。

● 目标序列复杂性问题：目标序列具有高度变异性或复杂结构，导致引物无法特异性结合。

③扩增产物存在多个带或模糊带：

● 引物设计问题：引物选择不当，导致非特异性扩增或引物间的非特异性结合。

● 目标序列问题：目标序列存在拷贝数变异或基因组重复区域，导致扩增产物不明确或杂交特异性差。

④扩增产物偏低/低效：

● 引物设计问题：引物长度不合适或GC含量偏高或偏低，影响引物的特异性和扩增效率。

● PCR条件问题：PCR反应条件不适当，如温度、时间和酶浓度等。

● 目标序列问题：目标序列可能具有复杂结构或高度变异性，使扩增困难。

⑤引物降解或污染：

● 引物贮存问题：引物储存条件不当，如暴露在高温或湿度环境下，导致引物的降解和损坏。

● 污染问题：实验操作中引物、试剂或反应管的污染，影响扩增结果。