服务介绍
DNA pull down是用于分析蛋白质与DNA互作的一种分析技术。一般来说,该实验首先需要针对待研究目的基因的调控区域设计并制备特异性探针(以脱硫生物素标记为主流);同时,制备细胞核提取物;将探针和核提取物共同孵育,DNA结合蛋白就会和靶向序列特异性结合;然后,通过亲和素磁珠纯化蛋白质DNA复合物;最后针对获得的蛋白,使用WB验证或者质谱方式鉴定蛋白质类型。
服务流程
接受订单及样品
样品准备及处理
探针标记
蛋白与探针共孵育
WB检测或者质谱鉴定
结果交付
客户提供
DNA序列相关信息或DNA过表达质粒
细胞样品
如WB检测则需提供特定蛋白一抗
送样要求:
1、质粒至少提供10ug
2、冻存细胞两只或复苏细胞两瓶
3、动物或植物组织至少500mg
4、细胞沉淀至少2*10的7次方
注:除了复苏细胞常温运输以外,其他样品均干冰运输。
最终交付
- 构建含目的基因的质粒、菌液,测序报告
- DNA Pull-down蛋白SDS-PAGE银染图
- WB检测报告/质谱鉴定分析报告
服务说明
服务名称 | 服务内容 | 交付内容及标准 | 服务周期(工作日) |
DNA pull-down | 探针扩增回收 | 扩增2次 | 16 |
蛋白提取+考染 | 1个样本 | ||
pull down实验 | 富集2次:IgG、IP各1次 | ||
SDS-PAGE银染 | 跑胶3个泳道:IgG、IP、input | 4 | |
质谱鉴定互作蛋白 | 质谱鉴定:IgG、IP | 10-15 |
案例展示
