DNA测序

DNA测序

  • 大规模测序
  • 快速稳定
  • PAGE纯化

服务特色

金开瑞测序平台应用ABI 3730XL测序平台,可为您提供快速稳定的测序服务。

服务介绍

DNA测序是指对DNA分子的核苷酸序列进行分析和测定的过程。DNA测序技术已经广泛应用于基因组学、生物学、医学、农业、环境科学等领域,为研究人员提供了研究生物体结构和功能的重要手段。目前,第一代DNA测序技术的出现,使得测序速度和准确度得到了大幅提升,有望进一步推动生命科学领域的研究和发展。

服务优势

  • 速度更快:PCR产物和质粒24h内发送测序结果,菌液样本48h内发送测序结果;
  • 测序更专业:正常样品有效测序长度可达800bp,测难度序列成功率高,品质有保障;
  • 服务更贴心:武汉三镇驻点,随时上门取样,24h售前售后服务,及时解决您的任何问题;
  • 活动更丰富:不间断推出各种惊喜活动,详情请咨询区域销售经理。

服务流程

接受订单及样品
样品处理
样品鉴定
上机测序
序列分析
结果发送

客户提供

测序信息单,测序样品(包括菌液、质粒、PCR产物)和测序引物。


最终交付

  • 测序结果,包括1份ab1格式的图谱文件和1份seq格式的序列文件

服务说明

服务内容

细分 服务周期
菌液测序/质粒测序/ PCR产物测序

<10反应

1-2工作日

≥10反应

1-2工作日

≥100反应

2-3工作日

大规模测序

2-3工作日
设计合成测序引物 合成量2ODPAGE 纯化 1-2工作日

案例展示

dna测序

常见问题与解析 (Q&A)

Q:DNA测序样品用什么溶液溶解比较好?

溶解DNA测序样品时,用灭菌蒸馏水溶解最好。DNA的测序反应也是Taq酶的聚合反应,需要一个最佳的酶反应条件。如果DNA用缓冲液溶解后,在进行测序反应时,DNA溶液中的缓冲液组份会影响测序反应的体系条件,造成Taq酶的聚合性能下降。   有很多客户在溶解DNA测序样品时使用TE Buffer。的确,TE Buffer能增加DNA样品保存期间的稳定性,并且TE Buffer对DNA测序反应的影响也较小,但根据我们的经验,我们还是推荐使用灭菌蒸馏水来溶解DNA测序样品。

Q:提供DNA测序样品时,提供何种形态的比较好?

我们推荐客户提供菌体,由我们来提取质粒,这样DNA样品比较稳定。如果您可以提供DNA样品,我们也很欢迎,但一定要注意样品纯度和数量。如果提供的DNA量不够,我们就需要对质粒进行转化,此时需收取转化费。有些质粒提取法提取的DNA质量很好,象TaKaRa、Qiagen、Promega的质粒制备试剂盒等。   提供的测序样品为PCR产物时,特别需要注意DNA的纯度和数量。PCR产物必须进行切胶回收,否则无法得到良好的测序效果。   有关DNA测序样品的详细情况请严格参照"测序样品的提供"部分的说明。

Q:DNA片段很长,一个反应读不到头,怎么办?

如果DNA片段在载体上,可以用载体上两端的引物同时测序,让其中间交叉互补,便可完全测通。如果这样还读不通,可根据已经测出的序列设计测序引物作进一步测序(此称为Primer Walking法),便可完全测通。

相关技术服务

相关资源

1、高通量测序技术如新一代测序(Next-Generation Sequencing, NGS)已经日趋成熟,Sanger测序(一代测序)为什么没有被完全取代?
    Sanger测序的准确性和可靠性使其成为这些特定应用领域的首选方法之一。尽管在大规模基因组测序中已经被新一代测序技术取代,但Sanger测序在需要高度准确性和可靠性的实验中仍然发挥着重要作用。例如:

    ● 基因克隆:Sanger测序常用于基因克隆中的序列验证。在构建基因工程载体或插入DNA片段时,需要确认目标序列的正确性和准确性。

    ● 突变检测:Sanger测序可以用于检测DNA序列中的点突变、插入缺失或重排等突变。它在研究遗传性疾病、癌症突变分析和个体基因组分析中具有重要作用。

    ● Sanger验证:在新一代测序(NGS)等高通量测序技术中,由于其可能存在的错误率,Sanger测序通常被用作验证方法。通过对特定区域进行Sanger测序,可以确认高通量测序结果的准确性。

 

2、Sanger测序(链终止法测序)和新一代测序技术对比介绍

分类

Sanger测序

新一代测序技术
原理

链终止法测序,通过合成链终止的核苷酸来确定DNA序列

并行测序原理,同时测序数百万至数十亿个片段
工作流程

DNA模板制备、引物设计、PCR扩增、测序、电泳分离、数据分析

DNA样本制备、文库构建、测序、数据分析
读长

较长(通常800-1,000个碱基对),适用于较小的DNA片段

较短(通常数十到数百个碱基对),适用于整个基因组的测序
产出

相对较低,单个测序仪器产出数百到数千个片段

高,单次测序可产出数百万至数十亿个片段
成本

相对较高,包括设备、试剂和人力成本

相对较低,高通量平台降低了测序成本
应用

适用于特定应用,如基因克隆、突变检测、Sanger验证等

适用于全基因组测序、转录组测序、表观遗传学等广泛应用
优势

可以得到较长的读长,序列质量较高

高通量、高效率、适用于大规模测序和多样本分析
局限性

产出量相对较低,不适用于大规模测序项目

读长较短,可能存在测序错误和序列重叠的问题
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