酵母三杂交
- 三元互作解析
- 自激活预筛质控
- 严格质控流程
- 应用场景广泛
服务特色
金开瑞酵母三杂交服务基于pBridge-Pmet25系统，通过甲硫氨酸精确调控第三组分表达，判定其对蛋白互作的促进、抑制或无影响。采用pBridge与pGADT7双质粒共转酵母菌株，配套多重报告基因保障数据可靠。全程包含自激活/毒性预筛及Met浓度梯度优化，确保诱导窗口最佳。适用于调控机制解析、药物靶点筛选及复合物动态研究，阳性结果可无缝衔接Co-IP、SPR/MST等互补验证。
服务介绍
酵母三杂交（Yeast Three-Hybrid） 是在传统酵母双杂交基础上发展而来的强大工具，用于检测和解析由三种组分构成的生物大分子复合物或调控事件。系统通常基于转录激活报告基因或泛素分离重建原理：在诱饵蛋白（Bait）和猎物蛋白（Prey）之间引入第三个桥接分子（RNA、小分子或适配蛋白），只有当三者形成功能性三元复合物时，才能激活下游报告基因表达，从而筛选出参与特定互作的未知因子。
✔ 核系统酵母三杂交： 适用于可溶性蛋白、转录因子及RNA结合蛋白的复合物筛选。利用杂交RNA分子作为桥梁，检测蛋白-RNA相互作用，或使用化学诱导二聚化小分子筛选药物靶点。
✔ 膜蛋白酵母三杂交（Split-Ubiquitin based）： 针对膜蛋白及跨膜复合物优化，通过胞质或内质网膜上泛素重建，真实反映膜环境中三元互作，特别适用于受体-配体-辅助蛋白的筛选。
服务优势
- 三元互作精准解析：基于pBridge-Pmet25系统，精确调控第三组分表达，直接判定其对蛋白互作的促进、抑制或无影响。
- 双质粒共转系统：pBridge（TRP1）与pGADT7（LEU）双标记筛选，共转AH109/Y2HGold菌株，操作简便高效。
- 四重报告基因保障：lacZ、HIS3、ADE2、MEL1多维度验证，结果可靠性高。
- 严格质控流程：自激活验证与毒性检测前置排除干扰，Met浓度梯度优化确保诱导表达窗口最佳。
- 应用场景广泛：适用于调控机制解析、药物靶点发现及复合物动态研究。
服务说明
服务流程
酵⺟杂交⽂库构建：
酵母杂交文库筛选
酵母杂交验证：
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服务项目 |
客户提供 | 最终交付 |
| 酵⺟杂交⽂库构建infusion同源重组 |
组织/细胞 |
1) DH10B⼤肠⽂库菌液10mL, OD值 0.5-0.7, 满⾜滴度>1×10^7, 插⼊率>95%， 平均⽚段⻓度>1000bp（若物种本⾝⽚段较短，该指标可做调整） |
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2) ⽂库质粒500μL， 浓度>1ug/μL |
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| 酵⺟杂交⽂库构建-Gateway | 组织/细胞 |
1) 交付初级⼤肠⽂库菌液2ml，次级⼤肠⽂库菌液6 mL ， 初级⽂库质粒200ug， 次级⽂库质粒400ug，插⼊率>95%，平均⽚段⻓度>1000bp（若物种本⾝⽚段较短，该指标可做调整）； |
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2)完整的结题报告，内含建库过程中的原始图⽚及原始数据 |
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| 文库筛选 | 蛋白序列/基因序列/质粒 |
筛选过程中的全部原始图片；筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果 |
| 酵母三杂交验证 |
酵母菌株，诱饵蛋白，猎物蛋白 |
完整版：交付结题报告及原始数据（包含⾃激活，共转化及稀释点种的原始图⽚） |
案例展示
