服务介绍
利用带有标签的已知蛋白作为诱饵蛋白(最常用的是GST标签,即谷胱甘肽巯基转移酶,glutathione S-transferase),诱饵蛋白特异性结合谷胱甘肽亲和树脂,当目的蛋白溶液过柱时,将诱饵蛋白及其相互作用的蛋白复合物捕获。复合物洗脱后,通过蛋白凝胶电泳分析两种蛋白间的相互作用,或者筛选相应的目的蛋白。
服务流程
接受订单及样品
诱饵蛋白与猎物蛋白原核表达载体的构建
诱饵蛋白与猎物蛋白的诱导表达
诱饵蛋白与猎物蛋白的纯化
Pull-down技术蛋白互作分析
WB进一步鉴定互作蛋白表达
客户提供
构建表达纯化靶蛋白与相关诱饵蛋白(也可选择由金开瑞构建),或者含有诱饵蛋白的细胞裂解上清或者其它;检测用一抗(也可选择由金开瑞提供)。
样品需-20℃冻存,冰袋运输。
最终交付
- 提供完整的实验报告, SDS-PAGE 以及WB结果
服务说明
服务名称 | 服务内容 | 交付内容及标准 | 服务周期(工作日) |
GST/His pull-down | pull down前WB验证 | 2个泳道(GST标签蛋白和His标签蛋白各1个) | 16 |
SDS-PAGE考染 | 2个泳道(GST标签蛋白和His标签蛋白各1个) | ||
pull down实验 | 对照组和实验组各1次 | ||
pull down后诱饵蛋白WB验证 | 4个泳道 | ||
SDS-PAGE银染 | 4个泳道 | 4 | |
质谱鉴定互作蛋白 | 对照组和实验组各1次 | 10-15 |
案例展示
