服务介绍
蛋白质与RNA的相互作用是许多细胞功能的核心,如蛋白质合成、mRNA组装、病毒复制、细胞发育调控等。使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。复合物洗脱后,通过WB实验检测特定的RNA结合蛋白是否与RNA相互作用。若待检测目的蛋白明确,选择WB鉴定;若不明确,则可选择质谱鉴定。
服务流程
接受订单及样品
RNA探针标记
与胞浆蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白质复合物
与磁珠结合,洗脱
WB检测或者质谱鉴定
结果交付
客户提供
RNA序列或者RNA序列构建的质粒(种属)
相同种属的细胞样品
最终交付
- 基因合成测序报告;
- 构建含目的基因的质粒、菌液,测序报告;
- 体外转录模版的sense&antisense引物、模版电泳图;
- RNA Pull down蛋白SDS-PAGE银染;
- 质谱鉴定报告。
服务说明
服务名称 | 服务内容 | 交付内容及标准 | 服务周期(工作日) |
RNA pull-down (体外转录法) |
基因合成 | 测序报告 | 具体评估 |
体外转录sense和 antisense模板扩增 | 体外转录2次 | 20 | |
sense和antisense体 外转录并标记为探针 | 探针标记2次(sense、 | ||
antisense各1次) | |||
RNA pull-down富集 | 2次 | ||
SDS-PAGE银染 | 跑胶3个泳道 | 4 | |
质谱鉴定互作蛋白 | 质谱鉴定sense、antisense | 10-15 | |
RNA pull-down (探针法拉蛋白) |
QPCR检测本 底表达 探针设计及合成 (包 含对照) |
样本和内参各1次 circRNA探针-biotin/lncRNA探 针-biotin/普通对照探针 |
24 |
RNA探针富集效果 检测 | 实验探针和对照探针各1次 | ||
RNA pull-down富集 | 实验探针和对照探针各1次 | ||
SDS-PAGE银染 | 跑胶3个泳道 | 4 | |
质谱鉴定互作蛋白 | 质谱鉴定对照组和实验组各1次 | 10-15 | |
RNA pull-down (探针法拉miRNA) |
QPCR检测本 | 样本和内参各1次 | 28 |
底表达 | |||
探针设计及合成 | circRNA探针-biotin/lncRNA探 针-biotin/对照探针 | ||
RNA探针富集效果 检测 | 实验探针和对照探针各1次 | ||
RNA pull-down富集 互作的蛋白/miRNA | 实验探针和对照探针各1次 | ||
RNA和miRNA/lncRNA 逆转录及检测 | QPCR检测(input、探针组、 对照组) |
案例展示
