服务介绍
金开瑞提供MTT/ CCK-8 Colony Forming检测服务， 可用于细胞增殖活性、细胞毒性检测； 药物筛选 (包括药物剂量及给药时机的筛选， 评价药物的安全性 等)；活性分子、蛋白抗体、细胞因子等的活性检测。
服务流程
客户提供
生长状态良好的实验细胞及细胞培养条件（冻存细胞需用干冰运输，培养细胞样品用装满培养液的培养瓶寄送，瓶口用封口膜封好）；
需准确告知实验设计内容，如样本浓度等，并提供实验所需药物等。
最终交付
- 实验原始数据、图片、分析结果；
- 实验流程及完整报告一份。
服务说明
| 服务项目 | 细分 | 服务周期 (工作日) |
| 细胞增殖/细胞毒性 |
MTT |
12 |
|
CCK8 |
||
|
Colony Forming |
30-35 |
案例展示
常见问题与解析 (Q&A)
细胞增殖相关实验包括有MTT/CCK8、EdU掺入、（软琼脂）克隆形成和细胞周期检测。 MTT/CCK8：一般在基因表达水平干预、细胞因子或药物干预等条件下，培养细胞后加入MTT/CCK8，反应的是细胞总体代谢活力水平，通过多孔板光度计（酶标仪）获取数值，可绘制细胞的生长曲线。 EdU掺入：在细胞培养过程中EdU，通过DNA合成水平，反应细胞增殖状态及比例，后续通过荧光显微镜或流式细胞仪获取数据。 （软琼脂）克隆形成：不同干预处理的细胞，在培养孔板中或铺有低熔点琼脂糖的培养孔板中，培养2周左右观察其形成单克隆的能力。软琼脂克隆形成主要用于悬浮细胞，或者在研究贴壁细胞的抗失巢凋亡（anoikis）能力时。 细胞周期：实验细胞经过PI染色后，进行流式细胞术分析，可以获得细胞在各个细胞周期（G1/G2/M）的分布比例。
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1、 有哪些检测细胞增殖的方法？
在细胞增殖检测中，MTT、CCK-8和Colony Forming是常用的方法之一。它们都有各自的优势和适用范围，因此使用频率相对较高。
MTT测定和CCK-8测定是常用的间接评估细胞增殖活性的方法，特别适用于高通量筛选和快速获得结果。它们在细胞代谢活性的评估方面比较方便，因此在许多实验中被广泛采用。
Colony Forming实验则用于评估细胞的克隆生成能力和增殖能力，通过直接观察和计数形成的细胞集落来推断细胞增殖能力。这种方法在研究细胞增殖能力和克隆性方面更为直接，常用于细胞生物学和肿瘤学研究中。
其他的细胞增殖检测方法如BrdU标记、Ki-67免疫染色、流式细胞术和细胞计数等也在特定的研究领域和实验中得到广泛应用。
总体而言，选择使用哪种方法取决于研究的目的、细胞类型、实验条件以及实验室的偏好。不同的方法可以提供不同的信息和实验结果，所以在设计实验时需要综合考虑各种因素。
2、 细胞增殖检测方法的介绍和优劣势对比
|
方法 |
原理 |
优势 |
劣势 |
| MTT测定 |
细胞将MTT溶液还原为紫色结晶体， 通过溶解和测量吸光度评估细胞增殖活性 |
简单、成本低、适用于高通量筛选 | 不能直接确定细胞数量，耗时 |
| CCK-8测定 |
细胞将CCK-8溶液中的染料还原为有颜色的产物， 通过测量吸光度评估细胞增殖活性 |
快速、简便、适用于高通量筛选 | 不能直接确定细胞数量，对少量细胞可能不敏感 |
| Colony Forming | 细胞形成集落，通过计数集落数量评估细胞增殖能力 | 直接评估细胞克隆生成能力和增殖能力 | 较长培养时间，依赖细胞克隆生成能力 |
| BrdU标记 |
细胞在培养基中摄取BrdU， 通过检测BrdU存在来评估正在进行DNA复制的细胞 |
直接标记正在进行DNA复制的细胞 | 需要特定抗体，不能区分细胞阶段 |
| Ki-67免疫染色 | 检测细胞中Ki-67蛋白的表达，其在细胞增殖过程中高表达 | 直接标记正在进行细胞增殖的细胞 | 不能区分细胞阶段，依赖特定抗体 |
| 流式细胞术 | 利用流式细胞仪检测细胞数量、大小和DNA含量等参数 | 快速、可获取多个参数信息 | 对设备要求较高，需要单个细胞悬浮 |
| 细胞计数 | 通过显微镜观察和手工计数细胞数量来确定细胞增殖 | 直接计数细胞数量 | 耗时，适用于少量细胞和小培养皿 |
3、 当涉及到细胞增殖检测方法的使用时，一些常见的研究领域和实验应用的示例
①肿瘤学研究：
▶ TT测定：评估肿瘤细胞系对抗肿瘤药物的敏感性和抗药性。
▶ Colony Forming：评估肿瘤干细胞的克隆生成能力和增殖能力。
▶ Ki-67免疫染色：检测肿瘤组织中Ki-67的表达水平，评估肿瘤细胞的增殖活性。
②药物筛选和毒性研究：
▶ CCK-8测定：进行高通量筛选，评估化合物对细胞增殖的影响。
▶ 流式细胞术：测定细胞周期分布，判断药物对细胞周期的影响。
▶ MTT测定：评估药物或化合物的细胞毒性作用。
③组织工程和再生医学：
▶ Colony Forming：评估干细胞的增殖和分化能力，用于组织工程和再生医学研究。
▶ 细胞计数：计算细胞数量以确定组织工程支架的细胞种植密度。
④免疫学研究：
▶ BrdU标记：标记正在进行DNA复制的免疫细胞，评估免疫细胞增殖活性。
▶ Ki-67免疫染色：检测免疫细胞中Ki-67的表达，评估其增殖能力和激活状态。
这些只是一些示例，实际上在各个研究领域和实验中可以使用不同的细胞增殖检测方法。选择合适的方法需要考虑研究问题、细胞类型和实验条件等因素，并根据实验目的进行决策。
