金开瑞提供高质量酵母双杂交服务,拥有齐全cDNA文库,10年经验团队,高效筛选与诱饵蛋白存在特异相互作用的蛋白
金开瑞酵母双杂交技术平台的核心竞争力
拥有较齐全的cDNA文库,确保筛选出与诱饵蛋白存在特异相互作用的蛋白
由10年从事酵母表达操作的实验员组成,确保实验高效准确
创新的三框文库构建方法,可保证片段长度、阳性率和文库滴度等信息的一致性。
一站式辅助检测手段,多重验证确保实验结论可靠
高效、可靠的蛋白质互作检测系统
设计诱饵蛋白(Bait)和猎物蛋白(Prey)的表达载体,选择合适的酵母菌株和报告基因系统。确定筛选条件和对照实验方案。
将目标基因克隆到诱饵和猎物载体中,进行测序验证,确保读码框正确,无突变发生。
使用LiAc/PEG方法将构建好的诱饵载体和猎物载体共转化到酵母感受态细胞中。
在四缺培养基(SD/-Leu/-Trp/-His/-Ade)上进行筛选,并通过β-半乳糖苷酶活性检测验证阳性克隆。
对阳性克隆进行验证实验,排除假阳性结果,确保蛋白质互作的特异性。
对实验结果进行系统分析,构建互作网络,提供详细的实验报告。
根据您的需求选择最合适的服务类型
服务项目 | 应用 | 互补实验 | 周期 |
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酵母杂交文库构建 | 酵母杂交筛选 | - | 4-6周 |
核酵母双杂交筛选 | 获得与已知蛋白互作的未知蛋白 | COIP,GST pulldown | 6-8周 |
膜酵母双杂交筛选 | 研究膜蛋白之间的互作 | COIP,GST pulldown | 8-10周 |
酵母单/双杂交验证 | 已知蛋白与蛋白/启动子之间的互作 | EMSA,双荧光素酶等 | 4-5周 |
服务项目 | 客户提供 | 最终交付 |
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文库构建 | 组织/细胞 | 滴度在1×10cfu/mL以上的酵母文库菌液;文库PCR鉴定结果图片(阳性率在90%左右) |
文库筛选 | 蛋白序列/基因序列/质粒 | 筛选过程中的全部原始图片;筛选获得所有相互作用的猎物蛋白的测序结果 |
关于酵母双杂交服务的疑问解答
酵母双杂交技术特别适合研究核蛋白和膜蛋白的相互作用。对于核蛋白,我们使用经典酵母双杂交系统;对于膜蛋白,则采用分离的泛素系统(split-ubiquitin)技术。此外,我们还提供针对不同亚细胞定位蛋白的定制化服务方案。
根据服务类型不同,所需样品有所区别:
我们的技术支持团队会在项目启动前提供详细的样品准备指南。
标准服务周期如下:
具体时间会根据项目复杂程度有所调整,加急服务可缩短30%时间。
我们采用多重质控确保结果可靠:
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