为什么众多科研人员选择金开瑞的Co-IP检测服务
采用特异性二抗进行检测，有效避免抗体重链对结果的信号干扰
优化的实验条件和技术流程，确保检测结果的灵敏度和可靠性
每一步实验都经过严格的质量控制，确保数据的准确性和可重复性
标准流程优化，缩短实验周期，快速交付高质量结果
标准化流程确保实验结果准确可靠
客户提交样品及相关信息，我们进行样品验收和登记
制备样品裂解液，并进行蛋白定量，确保实验材料符合要求
将样品与抗体及protein A/G凝胶进行孵育，形成免疫复合物
收集免疫沉淀物，进行洗涤去除非特异性结合，制备样品
通过Western Blot检测目标蛋白及相互作用蛋白
提供完整的实验报告和数据解读，确保客户获得有价值的结果
为确保实验顺利进行，请提供以下材料
| 服务名称 | 服务内容 | 交付内容及标准 | 服务周期(工作日) |
|---|---|---|---|
| 免疫共沉淀Co-IP | 蛋白提取 | 1个样本 | 16 |
| Co-IP前wb | 跑胶1个泳道 | ||
| Co-IP | 富集2次：IgG、IP各1次 | ||
| Co-IP后诱饵蛋白wb | 跑胶3个泳道：IgG、IP、input | ||
| SDS-PAGE银染 | 跑胶3个泳道：IgG、IP、input | 4 | |
| 质谱鉴定互作蛋白 | 质谱鉴定：IgG、IP | 10-15 |
众多成功案例，验证我们的专业能力
通过Co-IP技术成功验证两种蛋白在体内的相互作用，结果为后续功能研究提供有力证据。
（文献：Aberrant oligodendroglial LDL receptor orchestrates demyelination in chronic cerebral ischemia. 期刊：J Clin Invest IF：13.6）
利用Co-IP结合质谱技术，成功鉴定目标蛋白的相互作用网络，揭示新的生物学功能。
（文献：PFN1 Inhibits Myogenesis of Bovine Myoblast Cells via Cdc42-PAK/JNK. 期刊：Cells IF：5.2）
免疫共沉淀（Co-IP）技术主要用于：
CoIP实验需要保证足够的蛋白浓度才能维持原本存在的蛋白互作状态，尤其当蛋白丰度较低、相互作用力不强、使用不易提蛋白组织等情况时。而且CoIP的实验条件往往需要反复摸索。因此用于CoIP实验需准备细胞＞2x10^7，动物组织＞500mg，植物组织＞2g，并且须更加注意采集后速冻-80℃保存和避免反复冻融。
a.所使用的抗体不仅需要优秀的亲和力、特异性，其识别表位还可能被互作蛋白所掩蔽（主要是使用单抗时）；
b.当蛋白互作须发生在特定生理代谢条件、组织细胞类型之中时，CoIP实验可能无法获得互作结果；
c.如果诱饵蛋白和或捕获蛋白在样本中丰度很低时； d.两个互作蛋白的亲和力较弱；
e.当该蛋白互作需要较特定的离子强度，或者需要如Ca2+离子/Mg2+离子/ATP等辅因子时，要创造合适的反应条件会变得困难；
f.一些样品处理提取存在难度，提取足量目的蛋白与保持蛋白天然状态，需通过实验条件达到优化平衡；
g.外源表达的标签蛋白存在同内源蛋白的位点竞争，这主要在使用标签抗体进行实验时可能存在。
在CoIP-WB鉴定结果中，IgG组无目的蛋白条带、IP组有目的蛋白条带，说明IP过程成功；银染胶图中，IP组相对于IgG组有更多蛋白条带、且存在差异，说明CoIP过程捕获到互作蛋白；IP产物在质谱检测中鉴定到的蛋白数量不能作为判断实验成败的标准，因为这取决于目的蛋白本身所具有的互作蛋白数量、结合力强弱等方面；IP产物的质谱鉴定数量越多并不代表结果越好。
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