产品说明
Pfu Ⅱ高保真DNA聚合酶能与持续能力增强结构域融合，增加了保真度和速度，可作为独立的酶或以主混合物的形式提供，能够对各种模板进行高特异性扩增；是克隆的理想选择，可用于长的或困难的扩增子。与其他 DNA 聚合酶相比，Pfu Ⅱ高保真DNA聚合酶性能稳定，实验方案耗时少，能以更低的酶量实现更高的产出。
产品介绍
CAPfu Ⅱ DNA Polymerase是基于Pfu Ⅱ DNA Polymerasee经基因⼯程改造⽽成。在⼤肠杆菌中重组表达得到的⾼度热稳定的DNA聚合酶，与持续能⼒增强结构域融合，具有较⾼的扩增效率和保真性，⽤于扩增困难模板的扩增。扩增效率可以到达1kb/10s的速度，同时具有很强的长片扩增能力。
产品特点
高纯度：纯度＞95%，无核酸酶残留，宿主gDNA残留量低；
保真性好：相比Taq DNA Polymerase具有更高的保真性；
灵敏度高：经过改造提升了模板亲和力，提高了低浓度模板的检测灵敏度；
扩增片段长：可扩增长度达10kb的λ-DNA目的片段；
产品应用
长片段PCR扩增
DNA片段的克隆
产品数据
1、SDS-PAGE电泳图
图1. CSB-DEM043 Pfu Ⅱ DNA Polymerase SDS-PAGE电泳图
2、不同模板浓度扩增效果
M：Trans2K DNA Marker，NC：阴性对照。
图2. CSB-DEM043 Pfu Ⅱ DNA Polymerase扩增λ-DNA 1kb片段，不同模板量（100ng-1pg）均可有效扩增出目的片段，灵敏度低至1pg。
3、与竞品酶对比测试
Line 1-6：Pfu Ⅱ DNA Polymerase，λ-DNA 1/2/4/6/8/10Kb
Line 7-12：品牌N Pfu Ⅱ DNA聚合酶，λ-DNA 1/2/4/6/8/10Kb
M：Trans15K DNA Marker
图3. CSB-DEM043 Pfu Ⅱ DNA Polymerase 扩增λ-DNA 1-10kb片段，对比某品牌 Pfu Ⅱ DNA聚合酶
产品组分
产品参数
操作说明
【注】:a.引物浓度：一般来说反应体系中引物终浓度为0.2uM即可得到较好的效果。反应性能较差时，可在终浓度0.1uM-1.0uM范围内调整引物浓度。
b.模板浓度：动植物基因组DNA 0.1～1ug，大肠杆菌基因组DNA 10～100 ng，λDNA 0.1～10 ng，质粒DNA 0.1～10 ng。如模板为未稀释cDNA原液，使用体积不应超过qPCR反应总体积的1/10。
c.聚合酶浓度：酶量可在0.25 - 1uL之间调整。通常情况下加大酶量可以提高扩增产量，但有可能会使特异性下降。
d.Mg2+ 和添加剂：大部分PCR反应体系中的Mg2+浓度应在1.0–5.0 mM范围之内，但对于一些扩增困难的样本，例如高GC的DNA样本，可能需要在PCR反应体系中加入添加剂，例如DMSO或甲酰胺等。
【注】:e.退火温度和时间：退火温度需要根据引物的 Tm 值进行调整，一般设置成低于引物Tm值3~5℃即可。推荐退火时间设置为 20 sec，可以在 10-30 sec 内调节。
