产品说明
HemoTaq DNA Polymerase (Blood-resistant)是一种经过升级改造,重组表达的灵敏高耐受热启动Taq DNA聚合酶,采用抗体法修饰,具有5'-3' 聚合酶活性和5'-3' 核酸外切酶活性。配合优化的buffer体系,使其具有强大的杂质耐受力,尤其针对血液样本的直扩,具有极佳的耐受效果。
产品介绍
Hemo Taq DNA聚合酶是一款基于抗体法修饰,经过升级改造的新一代热启动Taq DNA 聚合酶,改造后的Taq DNA聚合酶,对广泛使用的强效 PCR 抑制剂具有高度抵抗力。此酶能够扩增人和小鼠全血样品中的 DNA 而无需事先提纯。Blood Taq DNA 聚合酶在 25 μL 反应体系中能够耐受高达 20%的全血(50 μL 反应体系中耐受 30%)。
产品特点
可应对血液提取样本以及血液裂解粗品的扩增;
良好的杂质耐受性能,适用多种检测场景。
产品应用
PCR、qPCR、血液耐杂的qPCR
产品数据
1、高灵敏度
图1.CSB-DEM044 HemoTaq DNA Polymerase的扩增灵敏度
2、Hemo Taq 热稳定性
图2. CSB-DEM044 Hemo Taq DNA Polymerase 37℃加速0天、7天、14天,稳定性良好
3、血液直扩普通PCR
Line 1、2:品牌Y耐全血酶
Line 3、4:品牌B耐全血酶
Line 5、6:Hemo Taq DNA Polymerase
图3.CSB-DEM044 Hemo Taq DNA Polymerase血液直扩
产品组分
产品参数
操作说明
【注】:a.引物浓度:一般来说反应体系中引物终浓度为0.2uM即可得到较好的效果。反应性能较差时,可在终浓度0.1uM-1.0uM范围内调整引物浓度。
b.模板浓度:最佳全血模板浓度范围为0.5%-20%,推荐使用量为5%作为初始尝试条件,即30μL反应体系中加入1.5μL全血作为模板,注意避免吸取血液凝块。
c.聚合酶浓度:推荐使用 0.05U/μL。酶量可在0.25 - 1uL之间调整。通常情况下加大酶量可以提高扩增产量,但有可能会使特异性下降。
d.荧光定量PCR:使用本产品进行荧光定量PCR时,在上述推荐体系中,加入0.3 μL 10μM TaqMan Probe(探针法)。
【注】:e.荧光定量PCR程序:(探针法)95℃ 5min;95℃ 10s,60℃ 30s*,40-45cycles。
f.退火温度和时间:退火温度需要根据引物的Tm值进行调整,退火时间可以在10-30 sec内调节。