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服务简介

免疫分析法以其灵敏度高、特异性好、样品通量大、检测迅速和成本低廉的特点,在药物残留、环境污染物等小分子化合物检测领域得到广泛应用,合成具有良好免疫原性的人工抗原是制备抗体和建立免疫分析方法的前提和关键。
       武汉金开瑞生物工程有限公司的小分子平台专业从事食品安全、兽药残留、人类和动物疾病诊断等领域小分子物质完全抗原的设计、合成及抗体制备与试剂盒开发。可针对您的需求,改造或者合成小分子化合物的衍生物,提供不同连接臂的半抗原,不同载体蛋白的完全抗原;可提供半抗原衍生物,完全抗原的仪器鉴定结果,也可根据您的需求提供Balb/C小鼠免疫检测结果;并提供相应的小分子化合物的多克隆和单克隆抗体制备及试剂盒开发等一系列服务。

小分子抗体应用

①小分子化合物的快速安全检测
       ②食品安全检测,如抗生素、违禁添加、药物滥用等
       ③疾病相关的代谢中间体检测,监测血药浓度
       ④毒品检测,兴奋剂检测等

服务流程
接收订单及样品
 
需求分析
 
抗原合成
 
抗原鉴定
 
免疫
 
融合
 
筛选
 
腹水
 
单抗纯化
客户提供

金开瑞制备完全抗原:客户需提供原料至少20 mg,纯度不低于90%以及标准品对应的CAS号;
       客户提供抗原:没有明显可见沉淀。

服务内容
服务名称 载体类型 交付结果 服务周期
半抗原改造 / 改造后的小分子衍生物LC-MS的鉴定结果 3-4周
完全抗原制备 牛血清白蛋白 完全抗原SDS-PAGE、UV或MALDI-TOF鉴定结果 3-4周
卵清蛋白
钥孔蓝蛋白
人血清白蛋白
人-γ球蛋白
单克隆抗体的制备 / 免疫检测结果,含ELISA的效价和特异性检测结果 4-5个月

案例展示

小分子ELISA试剂盒开发

项目背景
客户提供:

药物代谢分子**原料、标准品和ELISA检测的阳性和阴性血清样本。

客户要求:

1、提供试剂盒所需的高灵敏度抗体(IC50≈1-2ppb)
2、提供ELISA试剂盒标准曲线图及标准曲线线性范围;
3、提供检测样本数据;
4、提供ELISA基本参数评价结果[LOD(最低检测限);批内和批间变异系数;37℃加速稳定性实验];
5、定制的ELISA试剂盒成品(包被好的酶标板及配套的试剂盒组分等。)

结果展示

药物代谢分子**试剂盒的标准曲线各项参数

Conc OD1 OD2 Mean SD CV%
BLK 0 2.086 2.010 2.048 0.054 2.630
STD1 0.025 1.811 1.802 1.806 0.007 0.360
STD2 0.050 1.358 1.348 1.353 0.007 0.500
STD3 0.100 0.943 0.971 0.957 0.020 2.080
STD4 0.200 0.533 0.552 0.542 0.014 2.520
STD5 0.500 0.298 0.297 0.297 0.000 0.140
STD6 1.000 0.229 0.223 0.226 0.004 1.720

药物代谢分子**试剂盒的标准曲线拟合图

项目小结

该项目历经5个月,最终开发出IC50=0.2ppb的单克隆抗体,远远超出客户要求的1~2ppb,鉴于该抗体的高灵敏度,我公司直接建议客户开发跟液相质谱结果参照的高敏反应试剂盒。(备注:由于样本较难获取,该项目历时较长,但研发成功的成品试剂盒各项数据参数均超出客户的预期!)


小分子胶体金检测卡开发

项目背景
客户提供:

***原料、标准品和胶体金检测的阳性和阴性样本以及该项目进口胶体金检测卡5份

客户要求:

1、提供胶体金所需的高灵敏度抗体;
2、提供合适的划膜抗原浓度及金标抗体浓度和相应的稀释液,及相应的试纸条的标准品消线浓度;
3、提供检测样本数据;
4、提供胶体金基本参数评价结果[LOD(最低检测限);交叉反应率;加速稳定性实验;均一性]
5、定制的胶体金成品(检测卡及配套的组分等)

结果展示

1、抗体灵敏度及特异性:

线性相关系数R2≥0.98;IC50:0.369±0.05ppb;与其他小分子交叉率均 <0.1%

校准品 ***小分子 校准品 小分子1 小分子2 小分子3 小分子4
OD OD OD OD OD
0 2.601 0 2.609 2.672 2.672 2.734
0.025 2.217 0.5 2.754 2.719 2.594 2.742
0.075 2.028 2.5 2.598 2.591 2.508 2.557
0.225 1.644 5 2.635 2.51 2.603 2.709
0.675 0.869 10 2.793 2.782 2.771 2.937
2.025 0.276 50 2.742 2.826 2.64 2.859
100 2.609 2.586 2.476 2.641
R2 0.988
IC50 0.369

2、胶体金检测卡成品:

2.1 划膜条件

T线:***小分子-BSA    划膜浓度:0.5mg/ml
       C线:羊抗鼠IgG(5.0mg/ml     划膜浓度:0.6mg/ml

2.2 金标抗体

***小分子(42-7)单抗 (原始浓度:1.0mg/ml),标记后浓度:4ug/ml

2.3、结论

阴性C、T线正常; 阳性(100ul纯水添加1ppb***小分子)C线正常,T线消线。

项目小结

该项目历经11个月,最终开发出1ppb可消线的胶体金检测卡,远远超出客户的预期,鉴于该胶体金的灵敏度,客户与我公司建立了后期大量开发的协议,建立了良好的合作关系。(备注:由于样本较难获取,项目历时较长,但研发成功的成品胶体金检测卡各项数据参数均超出客户的预期!)


小分子胶体金检测卡开发

小分子A单克隆抗体

1. 零值OD值:1.8-2.1;
       2. 灵敏度(0.05ppb B/B0):90%~80%;
       3. 4.05ppb B/B0: <10%;
       4. 线性相关系数R2≥0.99;IC50:0.16±0.01ppb;

5. 交叉反应率:小分子A与小分子1、2、3的交叉反应率均小于1%

校准品(ppb) ** 校准品(ppb) 小分子1 小分子2 小分子3
OD OD OD OD
0 2.102 0 2.2816 1.9292 1.8454
2.042 2.1895 1.594 2.0306
0.05 1.713 2.5 2.5427 2.4528 2.4111
1.706 2.4342 2.3541 2.3565
0.15 1.089 5 2.4364 2.4755 2.4502
0.5 0.546 10 1.4292 1.3749 1.9973
1 0.413 20 2.3306 1.9765 2.0693
2 0.3015 40 2.1805 1.9356 1.7221
R2 0.99807
IC50 0.168

小分子B单克隆抗体

1. 零值OD值:1.8-2.0;
       2. 灵敏度(0.025ppb B/B0):90%~80%;
       3. 2.025ppb B/B0: <10%;<10%;
       4. 线性相关系数R2≥0.99;IC50:0.2±0.05ppb;

5. 交叉反应率:小分子B与小分子1、2、3、4、5、6、7、8的交叉反应率均小于1%

校准品 小分子B 校准品 小分子1 小分子2 小分子3 小分子4 小分子5 小分子6 小分子7 小分子8
OD OD OD OD OD OD OD OD OD
0 2.035 0 2.008 2.032 2.101 1.99 1.921 2.148 1.768 2.338
0.025 1.966 0.5 2.053 2.132 2.126 1.967 2.012 2.026 1.913 2.169
0.075 1.49 2.5 2.172 2.09 2.079 1.968 1.933 1.832 2.165 2.183
0.225 0.985 5 2.025 2.161 2.009 2.12 1.8 1.885 1.827 2.282
0.675 0.491 10 2.09 2.232 2.159 1.992 2.021 2.05 1.115 2.211
2.025 0.164 50 1.963 2.158 2.239 2.054 2.158 1.658 1.338 2.275
100 1.746 2.238 2.168 2.115 2.098 1.949 2.185 2.47
R2 0.98855
IC50 0.21157


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