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    在线课堂

蛋白抗体

  • ELISA试剂盒及胶体金应用型抗体的开发策略

    金开瑞试剂盒及胶体金服务拥有完善的ELISA试剂盒、胶体金免疫层析、荧光免疫层析开发平台,专业的研发技术人员,结合成熟的抗原、抗体研发系统,可从事科研及诊断靶点的试剂盒、胶体金的研发以及抗原和抗体的标记、样本代测、试剂盒及胶体金的组装等定制服务。

  • 蛋白质组学和单抗技术在农学课题中的综合运用策略

    与多克隆抗体相比,单克隆抗体针对单一的抗原表位,具有特异性更强,灵敏度更高的特点。使用单克隆抗体可免除不同细胞及微生物种或株间血清学上的交叉反应,大大提高诊断的特异性及敏感度。同时,单克隆抗体在研究细胞表面标志、提纯可溶性抗原、进一步研究抗体的结构和功能、抗体药物研究等方面都起到十分重要的作用

  • 噬菌体展示技术及其应用

    噬菌体展示技术通过将外源肽段和噬菌体衣壳蛋白融合展示于噬菌体表面,进行高通量筛选及富集,并对所需功能的克隆进行定性分析,该技术展示对象涵盖抗体、抗体片段、肽段、cDNA等。在对抗体库的研究中,噬菌体展示技术可对人和其他动物的B细胞抗体库进行体外建库筛选,避开了免疫和细胞融合等步骤从而缩短实验周期并增加了稳定性,该技术还具有筛选容量大、可发酵大量生产、方法简单等优点。

  • 酵母杂交相关流程及分析

    酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具,被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控,如鉴别DNA结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析DNA结合结构域信息等。

    酵母双杂交及系统是一种鉴定和检测蛋白质相互作用的研究方法,因其具有灵敏性高、功能强大、适用范围广等特点,现已被应用于多个研究领域。

蛋白质组学

  • 蛋白组学基本概念及主要技术简介

    蛋白质组学(proteomics)是从整体的角度,分析细胞(或组织等)内动态变化的蛋白质组成成份、表达水平与修饰状态,了解蛋白质之间的相互作用与联系,揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律的一门新的科学技术。

    本讲座从蛋白质组学基础知识介绍、基于质谱技术的蛋白质组学原理、蛋白质组学主要定性&定量技术介绍三个方面展开,让大家了解什么是蛋白质组学、蛋白质组学技术的发展,和目前主流的蛋白质组学技术及应用。

  • 修饰组学简介

    翻译后修饰(Post-translational modifications,PTMs) 是指对翻译后的蛋白质进行共价加工的过程,在一个或多个氨基酸残基加上修饰基团,可以改变蛋白质的理化性质,进而影响蛋白质的空间构像、活性状态、亚细胞定位、折叠及其稳定性以及蛋白互作。修饰蛋白质组可以对蛋白质修饰位点进行鉴定、定量和功能分析,具有高通量、更精确、更全面、更新颖等优势

    本讲座从PTM的背景介绍和应用,PTM研究方法等两个方面展开,对磷酸化、糖基化、乙酰化、泛素化及其他常见修饰蛋白质组进行了详细介绍。

  • 亚细胞器及 FFPE 蛋白组学简介

    亚细胞蛋白质组学(subcellular proteomics)是针对细胞内不同区域结构功能单位的蛋白质组学研究。

    基于石蜡包埋样本(FFPE)的蛋白质组学研究,在疾病机理研究、生物标志物发现,尤其是罕见病的研究中具有十分重要的意义。

    本讲座内容包含亚细胞器蛋白质组学的介绍、意义、技术支撑和应用,以及FFPE蛋白质组学研究意义、难点和技术应用。

  • 样本前处理

    样本上机前,需要经过一个样本前处理的过程,以达到减少人为降解和修饰,释放尽可能多的肽段的目的。

    本讲座对样本前处理过程进行了详细的讲解,包括常规样品的蛋白提取,还原、烷基化、质控,酶解、除盐、标记,肽段分级,翻译后修饰样本处理,样本量、取样和运输保存。

  • 蛋白质组学分析原理及方法比较

    利用蛋白质组学可以揭示生命活动的基本规律,同时也为临床诊断、药物筛选、新药开发和个性化医疗等诸多领域提供理论依据。

    本讲座从蛋白质组学技术简介出发,对质谱数据解析原理及方法、蛋白质组定量及评估、蛋白质组定量方法比较及选择等进行了详细介绍。

  • 蛋白质组学基础功能分析

    蛋白质组学技术的主要目的是为了找到一些具有特定功能、或调控特定通路的重要蛋白。当我们通过基本的定量蛋白质组学发现了成千上万个蛋白,发现了上百个表达量显著差异的蛋白后,我们就需要进一步对这些蛋白进行功能分析。

    本讲座详细介绍了蛋白质组学的基础功能分析相关内容,包括Gene Ontology Database,COG Analysis,KEGG Pathway Analysis 和Functional Enrichment。

  • 蛋白组学技术筛选marker用于蛋白抗体试剂盒制备

    从整体的角度,分析细胞(或组织等)内动态变化的蛋白质 组成成份、 表达水平与 修饰状态,了解蛋白质之间的 相互作用与联系,揭示蛋白质功能与细胞生命活动规律的一门新的科学技术。

分子互作

  • 双荧光素酶实验预测及应用研究

    双报告基因用于实验系统中作相关的或成比例的检测,通常一个报告基因作为内对照,使另一个报告基因的检测均一化。检测基因表达时双报告基因通常用来瞬时转染培养细胞,带有实验报告基因的载体共转染带有不同的报告基因作为对照的第二个载体。通常实验报告基因偶联到调控的启动子, 研究调控基因的结构和生理基础。报告基因表达活力的相对改变与偶联调控启动子转录活力的改变相关,偶联到组成型启动子的第二个报告基因,提供转录活力的内对照, 使测试不被实验条件变化所干扰。通过这种方法,可减少内在的变化因素所削弱的实验准确性,如,培养细胞的数目和活力的差别,细胞转染和裂解的效率。

  • CoIP和EMSA检测技术及应用研究

    免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CO-IP)是将样品中同抗体靶蛋白相互作用的蛋白一同随免疫复合物沉淀,可以检测两种目标蛋白质是否在体内存在相互作用,也可以确定一种蛋白在体内的相互作用蛋白。

    凝胶迁移或电泳迁移率检测(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术,可用于定性和定量分析;目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用,是转录因子研究的经典方法。

  • GST pull-down检测技术及应用研究

    蛋白-蛋白相互作用是蛋白质结构与功能研究中最重要的方面之一。GST pull-down将靶蛋白与GST融合表达,并将蛋白固化在谷胱甘肽(GSH)亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液过柱,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白),洗脱结合物后通过电泳分析,从而证实两种蛋白间的相互作用或筛选相应的目的蛋白。

    诱饵蛋白"和"捕获蛋白"均可通过细胞裂解物、纯化的蛋白、表达系统以及体外转录翻译系统等方法获得。此方法简单易行,操作方便。

    金开瑞现提供的GST pull down检测技术服务,使用特异性二抗进行检测,能有效避免抗体重链对结果的信号干扰,显著提升检测效果。

  • ChIP技术流程及应用研究

    染色质免疫沉淀技术(Chromatin immunoprecipitation assay, ChIP)是将样品中同抗体靶蛋白相互作用的DNA随免疫复合物沉淀,是研究体内蛋白质与DNA相互作用的有力工具,利用该技术不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰以及转录因子与基因表达的关系。

分子生物学

  • 基因合成和载体构建实验原理及关键步骤

    基因合成已经成为目前获得目的序列的最重要手段之一。

    载体构建是分子生物学研究中常用的实验技术,随着基因功能研究的深入,研究人员需要设计构建满足一定功能的载体,但载体构建操作繁琐、耗时耗力成为研究过程中的一块“绊脚石”。

    金开瑞自主研发了高通量,低成本的载体构建技术,能快速高效的帮您构建感兴趣的多种载体,极大程度为您节约时间成本,让您宝贵的时间花在“刀刃上”。

  • 引物和测序基本原理及应用研究

    引物合成可用于PCR、测序、全基因合成、亚克隆、点突变、载体构建、RNA干扰和基因重组等实验。根据不同的用途,可选择不同的纯化方式

课题设计

  • 外泌体非编码RNA的研究现状和策略

    外泌体(exosome),特指直径在40-100nm的盘状囊泡。其主要来源于细胞内内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。现已证实可以分泌外泌体的细胞有:肥大细胞、淋巴细胞、树突状细胞、肿瘤细胞、间充质干细胞等。

    外泌体在免疫中抗原呈递、肿瘤的生长与迁移、组织损伤的修复等生理病理上起着重要的作用。同时,不同细胞分泌的外泌体具有不用的组成成分和功能,可作为疾病诊断的生物标志物。

    可提供的服务:外泌体研究整体方案设计;外泌体提取/粒径测量/电镜检测;外泌体蛋白组/转录组/修饰组

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