多克隆抗体纯化方法
信息来源:金开瑞 作者:genecreate 发布时间:2023-07-26 11:26:42
多克隆抗体的纯化主要包括以下几个步骤:
收集细胞上清液或培养上清液:多克隆抗体是通过免疫动物(如小鼠、兔子等)产生的,因此首先需要收集包含抗体的细胞上清液或培养上清液。
蛋白A/G层析:将收集到的上清液通过蛋白A/G层析柱进行纯化。蛋白A/G是常用于捕获免疫球蛋白的亲和色谱基质,可以选择性地结合抗体。
洗脱:通过改变洗脱缓冲液的pH值或盐浓度等条件,将结合在蛋白A/G柱上的抗体洗脱下来。
纯化筛选:使用各种纯化筛选方法,如凝胶过滤、离子交换层析、尺寸排阻层析等,进一步去除杂质并提高抗体的纯度。
浓缩和储存:对纯化后的抗体进行浓缩处理,通常使用离心浓缩或超滤浓缩等方法。最后,将抗体在适当的储存缓冲液中保存,确保其稳定性和活性。
不同的实验室和应用可能会选择不同的纯化方法。因此,在具体操作时,建议根据实际需要和实验条件选择合适的纯化方法。此外,为了获得高质量的多克隆抗体,强烈建议进行后续的抗体验证和特性分析,以确保抗体的特异性和功能。
上一条:fish实验的步骤及原理
下一条:多克隆抗体单克隆抗体的区别及优势
最新动态
-
06.27
提取外泌体添加蛋白酶抑制剂的作用是什么?
-
06.26
外泌体提取的主要方法有哪些?分别有什么优缺点?
-
06.26
外泌体鉴定的金标准方法有哪些?怎么操作?
-
06.25
植物外泌体与动物外泌体的核心区别是什么?
-
06.24
酵母单杂交技术在基因转录调控研究中有哪些具体应用
-
06.24
离子交换层析纯化外泌体的原理和操作流程是怎样的?
-
06.23
与其他基因表达或蛋白相互作用检测方法相比,双荧光实验的优势和局限性是什么?
-
06.23
酵母双杂交实验结果通常通过哪些直观的现象或指标来判断蛋白质间是否存在相互作用?
-
06.23
组织样本提取外泌体前需要进行哪些预处理?
-
06.17
分子互作实验结果出现假阴性的常见原因及解决方法?