抗体制备公司在交付抗体时，除了抗体浓度、纯度，是否包含亲和力常数（KD值）、效价、内毒素含量等，还会提供哪些质检报告和相关数据？

    在抗体交付时，质检报告的内容会根据抗体类型（如单克隆抗体、多克隆抗体、基因工程抗体等）、应用场景（科研、诊断、治疗等）及客户需求有所差异。除了抗体浓度和纯度，亲和力常数（KD 值）、效价、内毒素含量等指标通常也会包含在质检报告中，部分高端应用（如临床前研究或治疗用抗体）还需提供更全面的安全性和功能性数据。以下是常见的质检报告内容及相关数据：

一、基础理化性质检测

1、抗体浓度

    检测方法：紫外分光光度法（OD280，基于 IgG 的消光系数 ε=1.4mg/mL・cm）、BCA 法或 Bradford 法（适用于含血清或复杂成分的样品）。

    数据形式：明确标注浓度值（如 1.0 mg/mL）及检测方法。

 

2、纯度

    检测方法：

    （1）SDS-PAGE（还原 / 非还原电泳）：评估抗体完整性及杂蛋白污染（如轻链、重链分子量分别约 25kDa、50kDa，纯度需≥95%）。

    （2）HPLC（尺寸排阻 / 离子交换层析）：定量分析聚集体（如多聚体≤5%）和降解产物。

    （3）数据形式：提供电泳图或 HPLC 色谱图，标注主峰占比。

二、功能活性检测

1、亲和力常数（KD值）

    检测方法：

    （1）表面等离子共振（SPR，如 Biacore）：实时监测抗体与抗原的结合和解离，计算 KD 值（范围通常为 nM 级，如 10⁻⁹ M）。

    （2）荧光偏振（FP）或流式细胞术（FACS）：适用于细胞表面抗原的亲和力检测。

    （3）数据形式：提供 KD 值及结合曲线，部分报告包含 association rate (ka) 和 dissociation rate (kd)。

 

2、效价（Titer）

    检测方法：

    （1）ELISA：通过梯度稀释抗体，测定能检测到特定信号的最高稀释倍数（如效价为 1:10⁵）。

    （2）中和试验（适用于功能型抗体）：检测抗体抑制抗原活性的能力（如中和效价 IC₅₀）。

    （3）数据形式：以滴度（如 1:5000）或 IC₅₀值（如 50 ng/mL）表示。

 

3、特异性

    检测方法：

    （1）Western blot：验证抗体与目标抗原的特异性结合（如在细胞裂解液中识别单一蛋白条带）。

    （2）免疫荧光（IF）或免疫组化（IHC）：确认抗体在组织或细胞中的定位特异性。

    （3）数据形式：提供实验图片或阳性 / 阴性对照结果。

 

三、安全性指标

1、内毒素含量

    检测方法：鲎试剂法（LAL 法）或重组 C 因子法，适用于治疗用抗体或细胞治疗级抗体。

    数据标准：科研级抗体通常≤10 EU/mg，临床级需≤0.1 EU/mg（符合 FDA 或药典标准）。

    数据形式：直接标注内毒素浓度（如 0.5 EU/mg）。

 

2、微生物污染

    检测项目：细菌、真菌、支原体、病毒（如逆转录病毒）。

    检测方法：

    （1）无菌培养法：接种至液体 / 固体培养基，观察是否有菌落生长。

    （2）支原体 PCR：灵敏度可达 10³ CFU/mL。

    （3）病毒因子检测：针对特定宿主细胞来源的病毒（如鼠源性抗体需检测小鼠白血病病毒 MLV）。

    （4）数据形式：阴性 / 阳性结果，或定量检测值（如支原体 DNA<100 copies/mL）。

 

3、宿主细胞蛋白（HCP）和 DNA 残留

    检测方法：ELISA 法检测 HCP 残留（通常≤0.1%），qPCR 法检测宿主 DNA 残留（如≤10 ng/mg）。

    应用场景：治疗用抗体或工业级抗体的必检项目。

 

四、其他定制化指标

1、糖基化分析（适用于治疗性抗体）
    检测方法：质谱（MS）或高效阴离子交换色谱（HPAEC），分析 Fc 段糖链组成（如岩藻糖含量、半乳糖基化程度），影响抗体的 ADCC/CDC 效应。

    数据形式：糖型分布比例（如 G0F=40%，G1F=35%，G2F=25%）。

 

2、热稳定性

    检测方法：差示扫描量热法（DSC）测定熔解温度（Tm 值），评估抗体在高温下的结构稳定性（如 IgG 的 Tm≥85℃）。

     数据形式：提供 Tm 值及热变性曲线。

 

3、动物源性成分（ADCF）检测

    检测方法：ELISA 或 PCR，确认生产过程中是否引入牛 / 猪源性成分（如无血清培养基需声明 ADCF-free）。

    数据形式：阴性结果或残留量（如牛 IgG<1 ng/mg）。

 

五、不同应用场景的报告差异

应用场景	必检指标（除浓度 / 纯度外）	可选附加指标
科研用抗体	效价、特异性（WB/IF）、内毒素（若用于细胞实验）	KD 值、热稳定性
诊断试剂原料	KD 值、交叉反应性、批间一致性	糖基化分析、长期稳定性数据
治疗性抗体（临床前）	内毒素、HCP、DNA 残留、无菌性、生物活性（如细胞增殖抑制率）	病毒清除验证报告、毒理学数据
工业级抗体（如亲和层析介质）	结合容量（如 mg 抗体 /mL 填料）、耐酸碱稳定性	循环使用次数验证、化学兼容性数据

    标准质检报告通常包含抗体浓度、纯度、亲和力（KD 值）、效价、内毒素等核心指标，而安全性数据（如微生物污染、HCP、DNA 残留）和功能活性数据（如特异性、中和活性）则根据应用场景选择性提供。对于高端需求（如临床研究），企业还需遵循 GLP/GMP 标准，提供完整的放行报告和可追溯的检测记录，确保抗体质量符合法规要求。交付时建议与供应商明确需求，避免因指标缺失影响后续实验或生产。