Co-IP实验中抗体选择的关键原则是什么?
信息来源:金开瑞 作者:genecreate_cn 发布时间:2025-06-16 14:06:14
选择要点
特异性验证:
用 Western blot 检测抗体是否只识别目标蛋白,无交叉反应(如检测细胞裂解液时单一条带)。
应用类型匹配:
选择注明 “适合 IP” 的抗体,避免仅适用于 WB(Western blot)的抗体(亲和力不足)。
亚型对照设置:
同物种、同亚型的 IgG 作为阴性对照,排除非特异性结合(如鼠 IgG 对照鼠源抗体)。
内源性表达水平:
若目标蛋白表达量低,可先用 RNA 干扰(RNAi)敲低后检测互作变化,验证特异性。
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