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酵母双杂交实验中如何避免假阳性？

信息来源：金开瑞作者：genecreate_cn 发布时间：2025-06-16 14:04:39

严格对照设置

阳性对照：已知互作蛋白（如p53-MDM2）；阴性对照：空载体共转化。

自激活验证：诱饵蛋白单独转化，检测报告基因（HIS3、ADE2）表达。

多轮筛选验证：初筛后用 3-AT（3-氨基三唑）抑制背景生长，再通过 β-半乳糖苷酶（X-gal）显色实验二次验证。

载体优化

使用双杂交系统（如 Matchmaker Gold），含4种报告基因，降低假阳性率。

诱饵蛋白去除转录激活域（AD），避免自主激活。

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