细胞活性氧检测试剂盒原理
活性氧检测试剂盒是用于检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的工具。它基于化学反应原理,通过与活性氧发生特定的化学反应,生成可检测的信号。
常见的活性氧检测试剂盒主要包括二苯基硫代巴比妥酸(Dichloro-dihydro-fluorescein diacetate,DCFH-DA)和二碳酰亚胺(dihydroethidium,DHE)等。
DCFH-DA原理:DCFH-DA是一种无荧光的化合物,可透过细胞膜进入细胞内。一旦进入细胞,DCFH-DA会被酯酶水解成DCFH,它可以在存在活性氧的条件下被氧化成高度荧光的二苯基苦味酸(DCF)。因此,通过测量DCF的荧光强度,可以间接反映细胞内活性氧水平的变化。
DHE原理:DHE是一种荧光探针,可以通过与超氧阴离子(superoxide anion,O2-)发生化学反应而产生荧光。DHE可以自由地穿过细胞膜,并在细胞内受到超氧阴离子的氧化,形成具有荧光的产品。因此,通过测量DHE荧光的强度,可以间接检测细胞内超氧阴离子的水平。
活性氧检测试剂盒利用特定的探针与活性氧发生化学反应,产生可检测的荧光信号或颜色变化。这些信号可以定量或定性地反映细胞内活性氧水平的变化,为研究活性氧相关的生物学过程提供了一种方便、快速和灵敏的方法。
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