定量蛋白质组学常见的研究技术及其原理
定量蛋白质组学是研究生物体内蛋白质的数量和功能的一种技术手段。在近年来,定量蛋白质组学已经成为了生命科学、药物研发、临床医学等领域中非常重要的研究手段。本文将介绍几种常见的定量蛋白质组学技术及其原理。
1、同位素标记法
同位素标记法是一种通过添加同位素标记对样品进行定量的方法。在该方法中,常用的两种标记方式是稳定同位素标记和放射性同位素标记。其中,稳定同位素标记利用同位素标记配对进行定量,一种常见的实现方式就是采用葡萄糖添加14C或13C标签的方法。随后,可以通过质谱仪等设备检测同位素的组成来计算物质的相对含量。
2、基于质谱的技术
基于质谱的技术是定量蛋白质组学中最为常用的方法之一。包括MS1轨迹和MS2轨迹的方法。在MS1轨迹中,通过量化样品中蛋白质峰的峰面积或峰高度来进行定量,而MS2轨迹则利用碎片离子生成的信息对蛋白质进行定量。这种方法可以在蛋白质分离和特征识别时使用,同时可以检测和鉴定蛋白质及其修饰。
3.基于色谱的技术
基于色谱的技术也是一种常用的定量蛋白质组学方法之一。包括单向和双向色谱法。其中,单向色谱法主要依赖于蛋白质的电荷、大小或亲水性等性质分离样品,而双向色谱法则采用两个不同的色谱技术进行二次分离,以提高分离效果和准确性。
4.混合质谱法
混合质谱法是将不同样品的蛋白质混合解析,并通过比较它们各自具有的特征来进行定量。其中,一种常见的实现方式是采用同位素标记法和基于质谱的技术相结合,通过量化不同标记样品之间的同位素比率来计算它们的相对含量。
定量蛋白质组学研究技术的发展不断迭代和完善,未来还将继续探索更加有效和高效的方法。
最新动态
-
09.30
免疫过程中若动物出现异常,多克隆抗体定制需如何调整方案?是否会影响最终抗体产量?
-
09.30
滚环扩增(RCA)技术能否用于长片段DNA合成?其通过环形模板实现DNA合成的原理与PCR扩增有何不同?
-
09.30
体外转录法siRNA合成后,为何必须进行DNase和磷酸酶处理?这些步骤如何影响siRNA的活性?
-
09.30
基因合成中“错误率”的主要来源是什么?常用的错误校正方法有哪些?
-
09.29
高通量筛选用DNA文库(如sgRNA文库)的DNA合成通常采用哪种技术路线?如何平衡DNA合成的成本与文库多样性?
-
09.29
高通量筛选用DNA文库(如sgRNA文库)的DNA合成通常采用哪种技术路线?如何平衡DNA合成的成本与文库多样性?
-
09.29
RNA合成产物的二级结构过强导致电泳条带异常,可通过哪些预处理?
-
09.29
合成多肽抗原的多克隆抗体定制,多肽序列设计需规避哪些风险?
-
09.28
基因合成在“定点突变”实验中,相比传统PCR定点突变法,有什么优势?(如多位点突变、大片段插入/缺失)
-
09.28
用于基因治疗的DNA合成产物,除序列正确性外,还需检测哪些指标(如内毒素、宿主菌残留、降解产物)以符合GMP标准?