【直播预告】学一下,从此酵母双杂交实验难逢敌手!
信息来源:金开瑞 作者:genecreate 发布时间:2020-10-26 08:57:03
分子生物学研究,尤其是人类基因组计划的迅速发展,为适应对众多基因或蛋白进行功能研究的发展趋势,已涌现出很多种新技术,酵母双杂交就是其中的一种。那么我们就来简单了解下酵母双杂交系统吧。
酵母双杂交系统是一种鉴定和检测蛋白质相互作用的研究方法,因其具有灵敏性高、功能强大、适用范围广等特点,现已被应用于多个研究领域。
核蛋白酵母双杂交:
核蛋白酵母双杂交技术最初由Fields等人在研究酵母转录因子GAL4性质时建立,后续经过不断改进已发展成为一种成熟的蛋白-蛋白互作研究工具,具有简便、灵敏、可反映蛋白在活细胞内互作真实情况的特点,被广泛应用于互作蛋白的筛选、蛋白相互作用的鉴定/验证、蛋白互作机理的探究、蛋白连锁图谱绘制等工作。

膜蛋白酵母双杂交:
DUALmembrane技术在传统的酵母双杂交系统的基础上,巧妙地利用分离的泛素系统(split-ubiquitin)进行蛋白质相互作用的筛选;泛素作为降解信号分子,人为分成两部分:N端(Nub),C端(Cub),互补重构的完整泛素分子可被泛素专一性蛋白酶(UBPs)识别,从而导致与泛素相连的蛋白被酶解。
DUALmembrane技术在传统的酵母双杂交系统的基础上,巧妙地利用分离的泛素系统(split-ubiquitin)进行蛋白质相互作用的筛选;泛素作为降解信号分子,人为分成两部分:N端(Nub),C端(Cub),互补重构的完整泛素分子可被泛素专一性蛋白酶(UBPs)识别,从而导致与泛素相连的蛋白被酶解。

酵母双杂交技术的应用
植物:自交不亲和机理研究……
病毒:朊蛋白、病毒蛋白相互作用蛋白筛选……
信号通路:转录因子、雌激素α受体相互作用蛋白筛选……
癌症医学:癌症相关蛋白、凋亡相关蛋白相互作用蛋白筛选……
寄生虫医学:毒力因子致病机制研究、半乳糖凝集素互作蛋白筛选……
基础原理研究:肌球蛋白、蛋白酶体调节因子相互作用蛋白筛选、受精卵发育……
酵母杂交优势
(1)真实环境
它是一种真核细胞内的反应,相对于众多的体外实验和细菌来说,更加贴近于真实。
(2)高度灵敏
(2)高度灵敏
酵母双杂交系统可以检测到十分微弱和短暂的蛋白相互作用。
(3)海量筛选
从cDNA文库中筛选与目的蛋白相互作用的新蛋白,在蛋白功能未知或已知的条件下,采用不同来源的cDNA文库作为prey 筛选,可以发现新的基因,提供新的线索。
A、核蛋白酵母双杂交
B、Split-ubiquitin膜蛋白酵母双杂交
C、cDNA质粒文库构建服务
(4)利用酵母双杂交建立基因组蛋白连锁图
众多的蛋白质之间在许多重要的生命活动中都是彼此协调和控制的,基因组中的编码蛋白质的基因之间存在着功能上的联系。
更多精彩请锁定我们的直播间哦,下周二(10月27日)晚八点不见不散!

温馨提示:微信扫码预约直播,开播前五分钟会收到开播提醒。
最新动态
-
03.24
IF:12.6首报!黄芪来源外泌体样纳米颗粒三重机制协同治疗前列腺癌
-
03.11
同为抗体,为什么一抗看“抗原种类”,二抗却看“一抗种属”?
-
03.11
J Nanobiotechnology(IF=12.6):蔓越莓“纳米邮差”递送麦角甾醇,重启早衰卵巢功能!
-
02.27
没有抗体?不是模式植物?DAP-seq照样搞定你的TF靶基因!
-
02.27
高分研究的共同选择:三篇权威文献背后的ChIP实验工具解析
-
02.27
表观遗传学进入“多维验证”时代,这些疾病机制再也藏不住了!
-
02.27
“药食同源”顶刊思路(IF=10.5)!来源鉴定+活性追踪+体内验证,全面解析无花果来源外泌体抑制乳腺癌骨转移的双重机制!
-
02.27
千年古方,纳米新生:科学家破解半夏如何“指挥”免疫细胞对抗肺癌!
-
01.29
技术跨界联用:表观遗传学进入“多维验证”时代,这些疾病机制再也藏不住了!文末有惊喜活动!
-
01.29
机制研究的金标准:金开瑞RIP/RNA pull-down试剂盒获多篇顶刊研究认可!


