服务介绍
哺乳细胞表达系统是一种利用哺乳动物细胞(如CHO细胞、HEK293细胞等)作为宿主细胞,通过转染外源表达载体来实现蛋白质的表达的技术。哺乳细胞表达系统在生物医学研究和应用中具有重要作用,特别适用于复杂蛋白质的表达和翻译后修饰,为疾病治疗和基础研究提供了重要工具。
服务优势
- 真实的蛋白质表达:能够产生与天然蛋白质更相似的结构和功能。
- 复杂修饰能力:能够进行正确的糖基化、磷酸化、乙酰化等修饰,使蛋白质更接近其在体内的形式。
- 高水平表达:能够实现高表达水平,满足大规模蛋白质需求。
- 可调控的表达系统:通过选择适当的启动子和调控元件,实现表达水平的调节和时序控制。
- 适用于复杂蛋白质:能够表达大型、复杂的蛋白质,如抗体、膜蛋白等。
服务说明
服务类型 |
细分 |
交付结果 |
周期 |
备注 |
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哺乳细胞瞬时转染表达 |
亚克隆及大提质粒 |
重组质粒,测序报告 |
2周 |
基因合成的费用另算,序列较长和有难度系数的,费用另计 |
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转染及小量表达(选其一) |
2ml体系检测 |
SDS图 |
2-3周 |
只交付图片结果,不交付蛋白,无论检测结果如何均收取全款 |
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80ml体系检测及预纯化 |
SDS图, 80ml纯化体系所得的蛋白 |
3-4周 |
如果最终未能交付蛋白;1.收取50%费用失败结题,该步骤不交付任何产品;2.免费更换其他载体进行尝试,如果最终仍然失败,则收取全款,该步骤不交付任何产品。 |
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1L细胞扩大培养及纯化(293T) |
>100pg纯化后的蛋白 |
3-4周 |
>100pg蛋白 |
相关资源
哺乳细胞表达系统的应用:
1、生物制药:哺乳细胞表达系统被广泛应用于生物制药领域,用于合成和表达重组蛋白质药物,如抗体、细胞因子、血液凝块因子等。
2、疫苗研发:哺乳细胞表达系统可用于合成和表达疫苗蛋白质抗原,用于疫苗研发和生产。它能够实现病原体蛋白质的正确折叠和修饰,从而提高疫苗的免疫原性。
3、功能研究:哺乳细胞表达系统可用于合成和表达特定的功能蛋白质,用于研究蛋白质的生物学功能、相互作用和信号传导机制等。
使用哺乳细胞表达系统时的一些注意事项
1、选择适当的细胞系:根据实验要求和目标蛋白质的特性,选择适合的哺乳细胞系,如CHO细胞、HEK293细胞等,确保能够高效表达目标蛋白质。
2、优化表达载体设计:合理设计表达载体,包括选择适当的启动子、调控元件和目标蛋白质编码序列,以实现高水平的蛋白质表达。
3、细胞培养条件优化:优化细胞培养条件,包括培养基配方、温度、CO2浓度和培养时间等,以提高细胞生长和蛋白质表达效率。
4、蛋白质稳定性考虑:对于易降解或不稳定的蛋白质,可以添加相关保护性序列(如信号肽、标签等)或选择稳定的细胞系,以增强蛋白质的稳定性和表达效果。
5、选择适当的转染方法:根据细胞系的特性选择适当的转染方法,如化学转染、电穿孔、病毒载体转染等,以实现高效的蛋白质表达。
6、时间点调控:根据目标蛋白质的表达动力学,选择适当的时间点进行细胞采集,以获取最佳的蛋白质表达水平。
7、细胞毒性检测:对于某些蛋白质表达可能引起细胞毒性的情况,应进行细胞毒性检测,确保细胞的健康和表达稳定。
8、纯化和分析:选择合适的蛋白质纯化和分析方法,如亲和层析、凝胶电泳、Western blotting、质谱分析等,以确保获得高纯度的目标蛋白质,并进行结构和功能分析。
9、生物安全性:在进行实验过程中,要遵循相关的生物安全操作规范,确保实验材料和废弃物的正确处理和处置,防止潜在的生物风险。