siRNA合成制备方法
信息来源:金开瑞 作者:genecreate 发布时间:2023-06-13 15:56:58
siRNA合成是一种人工合成小分子RNA序列的过程,常用于基因沉默实验以及药物研发。以下是一般的siRNA合成制备方法:
设计siRNA序列:在设计siRNA时,首先要选择目标基因的适当靶点,然后根据ATCG基本原则设计一条双链RNA序列。一般的siRNA序列由21-23个核苷酸组成,其中包含一个20-nt的完全匹配区和两个2-nt的3'端过度突出。
合成单链RNA前体:将设计好的siRNA序列分别合成两条互补的RNA单链前体。常用的RNA合成方法有化学合成法和酶切法等。
聚合产物纯化:将两条互补的RNA单链前体混合在一起形成双链RNA,并使用凝胶电泳、透析或HPLC等方法对产物进行提纯和纯化。
siRNA转染:将纯化后的siRNA转染到靶细胞中,通过RNA干扰技术实现基因靶向沉默。
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