分子互作实验中低亲和力互作的检测策略有哪些?
信息来源:金开瑞 作者:genecreate_cn 发布时间:2025-06-17 14:10:00
增强检测灵敏度的方法
1、延长孵育时间
Pull-down实验中 4℃孵育12-16小时,增加弱互作结合概率。
2、提高蛋白浓度
SPR实验中analyte浓度提升至1μM,或使用更高密度的配体固定。
3、信号放大技术
在Co-IP中加入链霉亲和素 - 生物素放大系统(如ABC试剂盒),增强WB信号。
4、替代技术选择
改用 MicroScale Thermophoresis(MST),通过热泳动检测nM级亲和力,样品量仅需1μL。
最新动态
-
09.30
免疫过程中若动物出现异常,多克隆抗体定制需如何调整方案?是否会影响最终抗体产量?
-
09.30
滚环扩增(RCA)技术能否用于长片段DNA合成?其通过环形模板实现DNA合成的原理与PCR扩增有何不同?
-
09.30
体外转录法siRNA合成后,为何必须进行DNase和磷酸酶处理?这些步骤如何影响siRNA的活性?
-
09.30
基因合成中“错误率”的主要来源是什么?常用的错误校正方法有哪些?
-
09.29
高通量筛选用DNA文库(如sgRNA文库)的DNA合成通常采用哪种技术路线?如何平衡DNA合成的成本与文库多样性?
-
09.29
高通量筛选用DNA文库(如sgRNA文库)的DNA合成通常采用哪种技术路线?如何平衡DNA合成的成本与文库多样性?
-
09.29
RNA合成产物的二级结构过强导致电泳条带异常,可通过哪些预处理?
-
09.29
合成多肽抗原的多克隆抗体定制,多肽序列设计需规避哪些风险?
-
09.28
基因合成在“定点突变”实验中,相比传统PCR定点突变法,有什么优势?(如多位点突变、大片段插入/缺失)
-
09.28
用于基因治疗的DNA合成产物,除序列正确性外,还需检测哪些指标(如内毒素、宿主菌残留、降解产物)以符合GMP标准?