分子互作实验中低亲和力互作的检测策略有哪些?
信息来源:金开瑞 作者:genecreate_cn 发布时间:2025-06-17 14:10:00
增强检测灵敏度的方法
1、延长孵育时间
Pull-down实验中 4℃孵育12-16小时,增加弱互作结合概率。
2、提高蛋白浓度
SPR实验中analyte浓度提升至1μM,或使用更高密度的配体固定。
3、信号放大技术
在Co-IP中加入链霉亲和素 - 生物素放大系统(如ABC试剂盒),增强WB信号。
4、替代技术选择
改用 MicroScale Thermophoresis(MST),通过热泳动检测nM级亲和力,样品量仅需1μL。

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