蛋白抗体表达服务包含哪些纯化环节？最终交付标准是什么?

一、蛋白抗体表达服务包含的核心纯化环节​

     蛋白抗体表达服务的纯化流程需根据表达系统（原核/大肠杆菌、真核/CHO/HEK293、昆虫细胞等）、蛋白抗体类型（单克隆抗体、多克隆抗体、融合蛋白等）调整，但核心环节通常遵循 “粗提→精细纯化→质控” 的逻辑，具体包括：​

    样品预处理（粗提环节）：表达完成后，先通过离心、过滤等方式分离细胞与培养液，再采用超声破碎（原核系统）、冻融法或酶解法裂解细胞，释放胞内 / 胞外的目的蛋白抗体；随后加入蛋白酶抑制剂防止降解，通过澄清过滤去除细胞碎片、杂质沉淀，得到粗提液。​

    亲和层析（核心纯化环节）：利用抗原 - 抗体特异性结合、标签（His、GST、Fc 等）与配体的亲和作用，实现目的蛋白抗体的初步富集。例如：单克隆抗体常用 Protein A/G/L亲和层析，His标签蛋白用镍柱亲和层析，该步骤可快速将目的蛋白抗体纯度提升至80%-90%，是纯化效率最高的环节。​

    精细纯化（去除微量杂质）：针对亲和层析后残留的杂蛋白、聚合物、内毒素等，补充1-2步精细纯化，常见方式包括：​

    离子交换层析（根据蛋白电荷差异分离）；​

    凝胶过滤层析（分子筛，按分子量大小去除聚合物和小分子杂质）；​

    疏水相互作用层析（针对疏水性差异优化纯度）。​

    脱盐/缓冲液置换：纯化后通过透析、超滤等方式，将蛋白抗体置换至客户需求的缓冲液体系（如PBS、Tris-HCl等），去除纯化过程中残留的盐分、配体等，同时浓缩至目标浓度。​

    无菌过滤与分装：最终通过0.22μm滤膜无菌过滤，避免微生物污染，再按客户需求分装（如100μL、1mL/管），冻存后交付。​

二、蛋白抗体表达服务最终交付产品的纯度标准​

    纯度标准需结合服务用途（科研用、临床前研究、工业级生产）和客户定制需求，行业主流标准如下：​

    科研级蛋白抗体（最常见）：​

    纯度≥90%（SDS-PAGE电泳检测，考马斯亮蓝染色，目的条带占比）；​

    部分服务商可提供≥95% 的高纯度选项（需额外优化纯化流程）；​

    内毒素含量≤1EU/μg（适用于细胞实验、动物免疫等场景）。​

    临床前 / 工业级蛋白抗体：​

    纯度≥95%（HPLC 检测，尺寸排阻色谱 SEC 或反相 HPLC，主峰占比）；​

    聚合物含量≤5%（避免影响活性和稳定性）；​

    内毒素含量≤0.1EU/μg（严格符合生物制药级标准）；​

    宿主细胞蛋白（HCP）残留≤100ppm，宿主细胞 DNA 残留≤10pg/μg（降低免疫原性风险）。​

 

    正规服务商的蛋白抗体表达服务，会在交付时提供完整的纯度检测报告，包含SDS-PAGE电泳图、HPLC图谱、内毒素检测数据等，确保纯度可追溯；​

    若客户有特殊需求（如无标签蛋白、极低内毒素、特定聚合度要求），可在合作初期与服务商确认，定制纯化方案并明确对应纯度标准。