COIP试剂盒里包含哪些关键组分?是否需要自备一抗/二抗?
一、COIP试剂盒标准包含组分
绝大多数商用CoIP试剂盒都会包含:
Protein A/G 琼脂糖珠/磁珠(核心沉淀介质)
细胞裂解液(含蛋白酶抑制剂)
洗涤液(Wash Buffer)
洗脱液(Elution Buffer)
上样缓冲液(Loading Buffer,可选)
阴性对照 IgG(正常兔/鼠 IgG)
说明书、实验流程图
部分标签专用型试剂盒(如Anti-Flag CoIP Kit)会额外包含:固定在珠子上的标签抗体(Anti-Flag、Anti-HA、Anti-Myc等)

二、是否需要自备一抗/二抗?
1. 做内源蛋白互作
必须自备一抗(目标蛋白的IP级抗体)
二抗用于后续WB,也要自备
2. 做标签蛋白(Flag/HA/Myc/GFP/His)
如果是通用型Protein A/G试剂盒: 需要自备标签抗体\
如果是专用标签试剂盒(如Anti-Flag CoIP Kit):不需要自备标签一抗,试剂盒已带
无论哪种:WB二抗都要自备
三、可直接复制的总结句(标书/报告可用)
CoIP试剂盒主要包含Protein A/G琼脂糖珠或磁珠、细胞裂解液、洗涤液、洗脱液及阴性对照IgG等核心组分。检测内源蛋白需自备特异性一抗;标签蛋白检测若使用通用型试剂盒需自备标签抗体,专用标签试剂盒则已包含对应标签抗体。免疫印迹二抗均需自备。
最新动态
-
10.16
当Cq值不能直接比:荧光定量PCR中被误用的六个假设
-
10.16
噬菌体展示的工程学真相:库容、遗传漂移与淘洗压力之间的三角关系
-
10.16
CUT&Tag的真实门槛:从"一万个细胞起"到"可信图谱"之间那些没人写在protocol里的失败
-
10.16
ChIP-seq实验设计的六道关口:从交联参数到生物学结论之间的断层带
-
10.15
酵母双杂交筛库的质量控制:从诱饵可用性到阳性克隆归一化的实战判据
-
10.15
酵母质粒小提的性能边界:破壁效率、纯度诊断与下游用途匹配
-
10.15
凝胶电泳迁移实验的判据体系:从泳道表达到单变量排查
-
10.15
细胞凋亡检测的证据链设计: 象限、时间窗与假阳性来源
-
10.14
LCA实验技术,连接酶介导的核酸扩增体系与生命周期评估方法学的双轨实践
-
10.14
荧光定量检测技术 | 定量体系的工程实现、多重探针设计与跨平台归一化


