双荧光素酶检测试剂盒的注意事项有哪些?
1、实验前
提前平衡试剂盒试剂至室温(避免低温影响酶活性)。
转染时建议使用无血清培养基或低血清培养基,减少血清成分对荧光素酶的抑制。
2、实验中
检测需在避光条件下进行,避免强光降解荧光素底物。
建议设置至少 3 个技术重复孔,降低随机误差。
3、实验后
发光信号通常在加样后数秒内达到峰值,需及时读取数据(建议 10 分钟内完成检测)。
若需保存样本,可在裂解后冻存于 - 80℃,但需避免反复冻融(可能导致酶活性损失)。
4、建议
试剂保存:荧光素酶底物需分装保存于 - 80℃,避免频繁冻融;裂解液可短期保存于 4℃。
仪器维护:定期清洁发光检测仪的样品仓,避免残留荧光污染后续实验。
文献参考:在方法学部分引用试剂盒说明书或品牌官网的实验流程,确保结果可重复性。
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