iptg诱导蛋白表达的原理
IPTG(异丙基β-D-硫代半乳糖苷)是一种人工合成化合物,常用于诱导蛋白表达的实验中。它的原理如下:
在一些实验室常用的蛋白表达系统中,例如大肠杆菌中的T7 RNA聚合酶系统,一个重要的组分是启动子,其中包含一个T7 RNA聚合酶的结合位点。
IPTG可以结合到T7 RNA聚合酶的结合位点上,与自然界存在的半乳糖苷类物质同样具有结合能力。当IPTG存在时,它结合到启动子上的结合位点上,抑制了启动子上的T7 RNA聚合酶的结合。
因此,当实验者向培养基中添加IPTG时,IPTG结合到启动子上,阻止T7 RNA聚合酶与之结合,从而阻断了目标基因的转录过程。
在没有IPTG存在的情况下,启动子上的T7 RNA聚合酶能够自由结合,从而启动目标基因的转录和翻译,导致蛋白表达。
IPTG通过阻断T7 RNA聚合酶与启动子的结合,从而控制和诱导目标基因的转录和蛋白表达。这种原理被广泛应用于实验室中的蛋白表达系统。
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