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Q:金开瑞蛋白表达平台有哪些优势?

蛋白表达是现代工业、医疗和基础研究领域的重要组成部分,金开瑞蛋白表达平台可针对目的蛋白的特殊性质,专业解决蛋白表达相关难题,如蛋白产量较低、蛋白表达为包涵体、表达蛋白没有活性、表达特殊蛋白(如膜蛋白、毒性蛋白等)、制备蛋白复合物、特殊氨基酸标记技术等,帮助您获得任意想要的蛋白。 目前,金开瑞蛋白表达平台已成功为全球各地客户提供3000余种重组蛋白产品,涵盖人类疾病相关蛋白(细胞因子、激素、酶、病毒抗原、重组抗体、片段抗体)、动植物蛋白和微生物蛋白。 金开瑞目前主要提供普通型及上清保证型大肠杆菌系统表达蛋白服务,详情请参见蛋白表达-大肠杆菌表达系统。

Q:蛋白分泌表达的优点是什么?

1) 一些可被细胞内蛋白酶所降解的蛋白质分泌到周质或培养基中可增加其稳定性; 2) 有些在细胞内表达时无活性的蛋白分泌表达时能够按适当的方式进行准确折叠,增加到蛋白的活性; 3) 由于蛋白质信号肽和编码序列间被切割,所以分泌蛋白产物不含氨基酸起始密码子ATG所编码的甲硫氨酸,而甲硫氨酸会影响很多蛋白的活性。

Q:为什么蛋白表达出来了,SDS-PAGE检测时大小不符?

影响因素有以下几点: ① 染料:首先,预染的蛋白 marker 常用于 WB(免疫印迹)实验中,因为可以直观地看到蛋白各个条带的颜色,所以给电泳,转膜以及裁膜带来了很大的方便。蛋白通过标记上各种颜色的染料,去实现蛋白的可见性,因为标记效率以及染料本身的分子量和电荷,对最后的染料-蛋白复合物的分子量是有影响的。 ② 蛋白性质:蛋白本身氨基酸含量,带电荷的多少,是否带有蛋白后修饰以及蛋白疏水的性质等,会对蛋白在 SDS-PAGE 的迁移模式造成影响。 ③ 电泳缓冲体系:不同电泳缓冲体系和基质成分,也会对蛋白条带的迁移特性造成一定的影响。

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