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Q:制备单抗还是多抗该如何选择?

如果对抗体的特异性要求高,用量较大或需要长期使用一致的抗体,制备的抗体应用要求多(WB/IP/IF/ICC等),可以选择制备单克隆抗体。 若对抗体的特异性要求不高,需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做ELISA检测,可以选择制备多克隆抗体。 另外多抗需要免疫原的量大,如果免疫原制备困难,建议制备单抗。多抗相比较单抗仍然有制备时间短、首次制备成本低的特点,在一些情况下也是一种选择。 在相同条件下,使用多抗可以提高检测的灵敏度,对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。

Q:单抗制备的大致步骤有哪些?

单抗制备整个流程大致包括:(1)抗原制备;(2)动物免疫;(3)细胞融合;(4)杂交瘤筛选及单克隆化;(5)抗体纯化。

Q:制备单克隆抗体,提供蛋白抗原,样品有什么要求?

分子量大于10kDa,B纯度>85%,浓度不低于0.5mg/ml,最好1–5mg/ml之间的可溶性蛋白。不应含有叠氮钠、咪唑、尿素或其它有毒有害刺激性大的物质。甘油含量应低于20%。质量大于3mg 必须提供如下信息:A SDS-PAGE检测图,清楚标示样品上样量,Marker上样量,和各自的浓度。 最好提供如下信息:C WB检测图

Q:小分子是否可以制备单抗需要提供哪些信息?

1)必须提供如下信息:A 分子式;B 获取方式 C 浓度和纯度; D HPLC鉴定结果。 (2)最好提供如下信息:C WB检测图。

Q:制备单抗,提供多肽,送样要求是什么,需要提供哪些信息?

(1)(1)多肽是否偶联载体,偶联载体多肽:总量大于6-7mg,纯度大于80%;浓度大于0.5mg/ml;未偶联载体多肽总量大于10mg,纯度大于90%;浓度大于0.5mg/ml (2)必须提供如下信息:A SDS-PAGE检测图,清楚标示样品上样量,Marker上样量,和各自的浓度。

Q:制备单抗,细菌样品,样品要求是什么,需要提供哪些信息?

必须供如下信息:A 是否对人致病;B 灭活方式;C 灭活前后SDS PAGE检测图,清楚标示样品上样量,Marker上样量,和各自的浓度。 注:不接收未灭活的致病菌,不接收致病菌。

Q:制备单抗,病毒样品,样品要求是什么,需要提供哪些信息?

必须供如下信息:A 是否对人致病;B 灭活方式;C 灭活前后SDS PAGE检测图,清楚标示样品上样量,Marker上样量,和各自的浓度。 注:不接收未灭活的致病病毒,不接收致病病毒。

Q:单抗制备服务交付的指标有哪些?

所有项目均提供: (1)项目结题报告,包括以下内容:小鼠血清效价,杂交瘤的构建(融合率、阳性率)、杂交瘤的克隆化、杂交瘤培养上清液的抗体特异性检测,以及杂交瘤诱生腹水的ELISA 效价检测。 (2)提供2-3 株杂交瘤细胞株和10ml腹水纯化的抗体,100ul腹水原液,1ml细胞上清; (3)提供的单抗腹水或者杂交瘤细胞株的上清经ELISA 检测与客户提供的抗原样品有特异性结合; (4)所提供的单抗腹水或者杂交瘤细胞株的上清经Western blot检测结果呈阳性。 需要另付费提供:

Q:什么是单克隆抗体?

动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,具有不同基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成效应B细胞(浆细胞)和记忆B细胞,大量的浆细胞克隆合成和分泌大量的抗体分子分布到血液、体液中。如果能选出一个制造一种专一抗体的浆细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体,称为单克隆抗体。 单抗的制备流程大致分为4步:①抗原制备,②动物免疫,③细胞融合,杂交瘤单克隆化,筛选及扩增,④抗体纯化。

Q:做单抗后测序筛选得到的序列是天然的吗?

不管是杂交瘤获得的可变区序列还是噬菌体获得的可变区序列,都是B淋巴细胞存在的抗体序列,可以认为是天然的,只是重链和轻链的组合可能不一样,不一定来源于同一个B淋巴细胞。

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