文献解读 | 煮熟猪肉来源外泌体囊泡包被的miRNAs对机体的代谢功能调控
“民以食为天,猪粮安天下。”
猪肉是中国居民餐桌上最主要的肉类来源,内含丰富的蛋白质、胆固醇和多种维生素,烹饪后食之。普遍认为高温会破坏生物活性物质,如使维生素、油脂分解,蛋白质变性。
2023年3月四川农业大学朱砺教授团队在Journal of Nanobiotechnology(中科院大类一区TOP,5年IF=11.509)杂志发表的Cooked pork-derived exosome nanovesicles mediate metabolic disorder-microRNA could be the culprit文章中,提出一种从高温煮熟后的猪肉中提取外泌体的方法,并对其内部富集的miRNA进行测序分析,接着深入分析了其对小鼠糖脂代谢等生物功能的调控。

研究内容与结果
首先,朱砺教授团队将猪肉(肥肉、肌肉、肝脏)在水中完全煮熟,再采用差速超速离心法提取其外泌体。该提取物在透射电镜(TEM)和原子力显微镜(AFM)下发现外泌体样纳米囊泡,进一步采用动态光散射仪(DLS)测得80%粒子在20-200nm,平均粒径为70.29nm。接下来,通过流式细胞术检测出外泌体特异性标志物CD63、CD81的阳性率分别为84.5%和95.9%。上述表征结果证实,煮熟的猪肉中能成功提取出外泌体。

熟猪肉外泌体(CM-Exo)的提取与表征
经过高通量测序分析发现,不同组织来源外泌体所包含的miRNA种类、含量不同。煮熟猪肌肉来源外泌体(PME)内含物miR-1、miR-133a-3p和miR-206 占总miRNA的80%;煮熟猪肝脏来源外泌体(PLE)中miR-122最多,占37.8%;而煮熟猪脂肪来源外泌体(PFE)中miR-125b含量最高。

饲喂CM-Exo对小鼠生长的影响
将提取出来的外泌体饲喂小鼠一段时间后发现:(1)体重明显增加;(2)血液中miR-1、miR-133a-3p、miR-206、miR-99a水平显著增加,肠囊外翻实验中这4个miRNA水平依旧显著升高;(3)肝组织中出现空泡以及脂滴;(4)空腹注射葡萄糖后血糖水平明显升高且消耗速度减慢。实验结果证实,CM-Exo能被肠道吸收进入小鼠体内从而影响体重以及血液miRNA,并参与机体葡萄糖耐受、胰岛素抵抗、肝脏脂质代谢等生物调控过程。

CM-Exo对小鼠肝脏转录组以及糖脂质代谢的调控
对小鼠肝脏样本进行转录组分析,鉴定出446个差异表达的基因(GDE),包括292个上调和174个下调的基因。GO和KEGG富集分析结果表明,GDE主要富集在类固醇代谢过程。
接下来,构建了一个潜在的miRNA-mRNA-脂质代谢通路调控网络,并检测到外泌体miRNA与肝脏脂质代谢通路之间存在着明显的相互联系。
文章小结
该团队采用差速超速离心法成功从煮熟的猪肉(肥肉、肌肉、肝脏)中提取出外泌体,经过测序分析发现不同组织来源外泌体包被的miRNA之间存在明显差异。通过小鼠饲喂外泌体以及肠囊外翻实验证实,CM-Exo能被肠道吸收进入机体从而影响体重以及血液miRNA,引起胰岛素抵抗和肝脏脂质代谢紊乱。总而言之,CM-Exo中的microRNA很可能是引起小鼠代谢紊乱的关键调节因子。
文献来源
Shen, L., Ma, J., Yang, Y. et al. Cooked pork-derived exosome nanovesicles mediate metabolic disorder—microRNA could be the culprit. J Nanobiotechnol 21, 83 (2023). https://doi.org/10.1186/s12951-023-01837-y
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