金开瑞生物超滤离心管(15 mL)全新上市|蛋白浓缩· 脱盐 · 缓冲液置换,一根搞定
金开瑞生物全新推出 15 mL 超滤离心管:改良聚醚砜(PES)超滤膜,有效膜面积 9.5 cm²,6 档截留分子量(MWCO 3–100 kDa)现货供应,最高 25–50 倍浓缩效率、90% 以上回收率。一文带你搞懂它怎么选、怎么用、哪些坑别踩。

▲ 金开瑞超滤离心管(15 mL)
1、超滤管是什么?怎么用?
超滤离心管靠“离心力 + 滤膜”工作:离心时小分子(盐、缓冲离子、游离小分子)穿膜流出,大分子(蛋白、抗体、核酸、外泌体等)被截留浓缩,脱盐、换液一步到位。内置约 200 μL 物理止滤点,自动防过浓缩、防样品损失。
▪样品浓缩:蛋白、抗原、抗体、酶、核酸(DNA/RNA)、外泌体等;
▪脱盐 / 缓冲液置换:如 PBS 切换到 Tris、HEPES 体系;
▪分离前处理:HPLC 上样前去蛋白,去除引物、连接子、小分子抑制剂;
▪颗粒样品:纳米颗粒、病毒样颗粒(VLP)、外泌体的浓缩回收。
2、超滤管型号怎么选?
记住铁律:MWCO ≤ 目标分子量的 1/3 截留最稳;MWCO 越小越彻底但流速越慢,拿不准就选小一档,重要样品建议预实验。
MWCO 选型速查(含对应货号)
|
目标分子 |
分子量 |
推荐 MWCO |
对应货号 |
|
多肽 / 小蛋白 |
< 10 kDa |
3 kDa |
JKR-CM-1503 |
|
一般抗体 / 球蛋白 |
20–80 kDa |
10 / 30 kDa |
JKR-CM-1510/1530 |
|
IgG |
150 kDa |
30 / 50 kDa |
JKR-CM-1530/1550 |
|
IgM |
900 kDa |
100 kDa |
JKR-CM-15100 |
|
酶(典型) |
50–100 kDa |
30 kDa |
JKR-CM-1530 |
>包装规格:2 支/包、3 包/盒,96 支/箱;另有 5 kDa(JKR-CM-1505)可选。
3、标准操作五步走
1.预润洗:水平转子加 15 mL(角转子 12 mL)PBS 或超纯水,2000–2500 × g 离心 5–10 分钟弃液,去除膜上甘油保孔剂;
2.上样:角转子≤ 12 mL、水平转子 ≤ 15 mL,枪头勿碰膜底,含沉淀先 0.22 μm 过滤,严格配平(差 ≤ 0.1 g);
3.离心:≤ 4000 × g 离心 15–40 分钟,多数样品 20 分钟即可达标;
4.回收:立即用移液器吸出浓缩液;残留最后 50–100 μL 可加 100–200 μL 缓冲液吹打再吸,回收率提至 95% 以上;
5.换液:浓缩至原体积 1/3–1/2 → 加目标缓冲液混匀 → 再离心,重复 3 次以上置换率 > 99%。
红线:严禁超过最大安全离心力 5000 × g,离心全程必须严格配平,否则裂管、样品全损。
4、避坑要点
▪沉淀必先去除:蛋白聚集体会不可逆堵膜,流速归零即报废;
▪起始浓度≥ 1 mg/mL:过低会因膜吸附导致回收率骤降;浓缩倍数建议≤ 20×;
▪膜不可晾干:干燥后孔径改变、基本报废,暂不用须保湿 4 ℃ 存放;
▪非无菌产品:严禁高温高压灭菌、次氯酸钠消毒;表面消毒仅限 70% 乙醇短时处理;
▪高盐(> 500 mM)先稀释:缓冲液 pH 差 ≤ 1,防止蛋白沉淀;
▪一次性使用:科研发表、GMP/GLP 场景禁止复用,珍贵样本不复用。
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